【摘 要】
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目的：将结核分枝杆菌Ag85A抗原基因克隆并在大肠杆菌中表达。方法：用PCR方法从结核分枝杆菌基因组中扩增Ag85A抗原基因,然后将其插入到原核表达载体pGEX5T中,构建成pGEX5T-Ag85
【机 构】
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第二军医大学基础部医学遗传学教研室,海军医学研究所舰艇卫生研究室
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目的：将结核分枝杆菌Ag85A抗原基因克隆并在大肠杆菌中表达。方法：用PCR方法从结核分枝杆菌基因组中扩增Ag85A抗原基因,然后将其插入到原核表达载体pGEX5T中,构建成pGEX5T-Ag85A重组质粒。经IPTG诱导使该基因在E.coli k802菌中表达,亲和层析法纯化蛋白,Western印迹法验证表达蛋白的抗原性。结果：扩增出了约0.9kb的单一条带,并成功地构建了pGEX5T-Ag85A重组子;经IPTG诱导后,Ag85A蛋白在k802菌中获得了表达,表达的蛋白条带大小约58000,与预期结果
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