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目的
探讨长链非编码RNA(LncRNA)Linc01278对前列腺癌细胞增殖、侵袭迁移、肿瘤表型的影响及分子机制。
方法收集2018年12月至2019年12月商丘市第一人民医院泌尿外科确诊的46例前列腺癌患者的肿瘤组织及癌旁组织,实时荧光定量PCR(qPCR)检测组织中Linc01278及miR-145的表达含量。培养人前列腺癌细胞PC-3,采用细胞转染技术将PC-3细胞分为:空白组、对照组、过表达组及恢复组。空白组未予以任何处理,对照组转染空白对照载体及miRNA阴性对照,过表达组转染Linc01278过表达载体及miRNA阴性对照,恢复组转染Linc01278过表达载体及miR-145模拟物(mimics)。双荧光素酶报告基因实验分析Linc01278与miR-145的结合作用。Transwell实验检测各组细胞侵袭迁移能力;CCK-8法检测各组细胞增殖能力。Western blot检测各组细胞中Oct4与Sox2的表达含量;qPCR检测各组细胞中Oct4、Sox2及miR-145的表达含量。
结果相比癌旁组织,Linc01278在前列腺癌组织中显著高表达(0.012±0.002 vs 0.022±0.002)(P=0.0072),miR-145则显著低表达(0.117±0.011 vs 0.081±0.007)(P=0.0005),两者表达呈负相关(P=0.0012)。Targetscan分析发现Linc01278转录本804-825位置与miR-145存在碱基互补配对。双荧光素酶报告基因结果显示miR-145 mimics可显著下调Linc01278的荧光素酶活性(P