【摘 要】
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为进一步研究磷脂酶C(phospholipase C)的性质,以一株实验室前期验证的产磷脂酶C铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的染色体为模板,扩增得到磷脂酶C的编码基因PAplc。构
【机 构】
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江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学生物工程学院
【基金项目】
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国家重点研发计划(2018YFA0900300)
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为进一步研究磷脂酶C(phospholipase C)的性质,以一株实验室前期验证的产磷脂酶C铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的染色体为模板,扩增得到磷脂酶C的编码基因PAplc。构建重组大肠杆菌表达质粒pET28a-PAplc,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。SDS-PAGE分析发现,重组PAplc蛋白主要以包涵体形式出现,分子量8.5×10^(4)。以直接稀释法复性,蛋白回收率27.5%,纯度大于98%。以p-NPPC法测得重组PAplc比酶活为63.79 U/
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