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目的
探讨4-羟基他莫昔芬(4-OHT)能否通过逆转三阴性乳腺癌(TNBC)细胞间质表型降低细胞侵袭转移的能力。
方法采用倒置显微镜观察细胞形态、Transwell法测定细胞迁移能力、Western blot检测E-cadherin,Vimentin和Actin蛋白的表达、免疫荧光显微技术观察E-cadherin,Vimentin蛋白的分布、Real-time聚合酶链式反应(PCR)技术检测微小RNA(miR)-200c表达观察细胞侵袭转移能力的变化。动物实验建立乳腺癌肺转移模型,检测裸鼠肺组织标本中乳腺癌细胞的侵袭转移情况。
结果4-OHT能够通过上调TNBC中E-cadherin表达,下调Vimentin表达逆转上皮间质转化(EMT);Transwell实验证实在MDA-MB-231和MCF-7/ADR细胞中4-OHT能够分别降低细胞的迁移能力至59.4%和43.2%;4-OHT处理后细胞转移能力减退,肺转移成瘤率降至66.7%;4-OHT能够将TNBC MDA-MB-231和MCF-7/ADR中miR-200c的相对表达量分别升高至280%和450%,而MCF-7的miR-200c水平无明显变化;抑制miR-200c的表达后,4-OHT不能够降低TNBC细胞的侵袭迁移能力。
结论4-OHT能够上调miR-200c的表达,逆转三阴性乳腺癌细胞间质表型降低细胞侵袭转移的能力。