一种用于穿透多肽筛选的随机文库的构建及筛选

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xuwei5858

【摘要】

：

以增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescence protein,EGFP）为示踪物,在pET-14b载体上构建编码12个氨基酸的随机多肽表达文库.建立一种简便、经济、有效的文库筛选方法,

【作者】

：

刘瑜刘亚伟李海玉刘靖华邓鹏姜勇

【机构】

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南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室和病理生理学教研室

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2006年6期

【关键词】

：

细胞穿透多肽随机多肽文库跨膜转运内化 cell penetrating peptide random peptide library transloc

【基金项目】

：

国家973计划项目（No.2002CB513005）,国家高技术研究发展（863）计划课题（No.2001AA234061）,广州市科技计划项目（No.2001-Z-035-01-1）,广东省自然科学基金重点项目（No.13058）,广东省科技计划项目（NO.A1090202）

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以增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescence protein,EGFP）为示踪物,在pET-14b载体上构建编码12个氨基酸的随机多肽表达文库.建立一种简便、经济、有效的文库筛选方法,从所构建的文库中筛选出细胞穿透多肽（cell-penetrating peptide,CPP）.采用点突变技术,首先在pET-14b载体多克隆位点Nde Ⅰ和Xho Ⅰ之间加入4个限制性内切酶位点,随后在BamHⅠ位点后加入三联终止密码子,接着再利用亚克隆的方法在Kpn Ⅰ和Xho Ⅰ之间插入

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