一种用于穿透多肽筛选的随机文库的构建及筛选

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuwei5858
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以增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)为示踪物,在pET-14b载体上构建编码12个氨基酸的随机多肽表达文库.建立一种简便、经济、有效的文库筛选方法,从所构建的文库中筛选出细胞穿透多肽(cell-penetrating peptide,CPP).采用点突变技术,首先在pET-14b载体多克隆位点Nde Ⅰ和Xho Ⅰ之间加入4个限制性内切酶位点,随后在BamHⅠ位点后加入三联终止密码子,接着再利用亚克隆的方法在Kpn Ⅰ和Xho Ⅰ之间插入
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