小鼠胚胎干细胞p16^INK4a基因外显子1α打靶研究

来源 :遗传学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lxkeinsun

【摘要】

：

在活体水平上，小鼠p16^INK4a基因是否具有抑制肿瘤发生和发展的功能是一个悬而未决的问题。利用筛选基因组文库得到的小鼠p16^INK4a基因组DNA片段，构建了针对小鼠p16^INK4a基因

【作者】

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龚振明李坚等

【机构】

：

第二军医大学医学遗传教研室,上海交通大学动物科学系

【出处】

：

遗传学报

【发表日期】

：

2002年1期

【关键词】

：

P16^INK4A 基因打靶小鼠胚胎干细胞外显子1a p16INK4aknockout

【基金项目】

：

国家自然科学基金重点项目 ( 39830 36 0 ),,上海联合利华科技和发展基金 ( 980 8)~~

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在活体水平上，小鼠p16^INK4a基因是否具有抑制肿瘤发生和发展的功能是一个悬而未决的问题。利用筛选基因组文库得到的小鼠p16^INK4a基因组DNA片段，构建了针对小鼠p16^INK4a基因外显子1a的基因打靶载体，其短臂为1.5kbEco81 I/AccⅡ片段，长壁为5.9kb Xba I/Xho I片段。打靶载体经线性化和纯化后通过电穿孔转导小鼠R1 ES细胞，获得37个G418和Gancyclovir双药抗性克隆。用Southern杂交法对双药抗性克隆进行鉴定，获得一个敲除了p16^INK4a基

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