【摘 要】
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目的:探讨京尼平(genipin,GEN)对高糖损伤的大鼠心肌H9c2细胞的抗氧化作用和抑制细胞凋亡的机制。方法:体外培养大鼠心肌H9c2细胞,高浓度(50 mmol/L)葡萄糖处理H9c2细胞建立
【机 构】
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齐齐哈尔医学院生物化学教研室; 齐齐哈尔医学院附属第三医院内分泌科; 齐齐哈尔医学院附属第二医院; 齐齐哈尔医学院齐齐哈尔市五官医院;
【基金项目】
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黑龙江博士后管理办公室博士后研究人员落户黑龙江科研启动资助项目(No.LBH-Q16225);齐齐哈尔市科学技术计划项目(No.SFGG-201629);齐齐哈尔医学院院内科研基金资助项目(No.QY2016LX-01;No.QMSI2017M-06;No.QY2017Q-07)
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目的:探讨京尼平(genipin,GEN)对高糖损伤的大鼠心肌H9c2细胞的抗氧化作用和抑制细胞凋亡的机制。方法:体外培养大鼠心肌H9c2细胞,高浓度(50 mmol/L)葡萄糖处理H9c2细胞建立细胞损伤模型,分为正常糖对照组(NC组,葡萄糖浓度为5.6 mmol/L)、高糖损伤组(HG组,葡萄糖浓度为50 mmol/L)、正常糖+京尼平组(NC+GEN组)和高糖+京尼平组(HG+GEN组,京尼平浓度为10μmol/L)。CCK-8法检测细胞活力;酶标法和WST-1法分别测定细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;微板法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;荧光探针DCF检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;ELISA法检测核小体片段的聚集值;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测细胞内线粒体膜电位变化;利用Western blot法检测线粒体内抗氧化酶锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD),以及早期凋亡蛋白细胞色素C(Cyt C)、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:与HG组比较,HG+GEN组细胞活力显著升高(P <0.05),细胞内MDA的含量及细胞上清液中LDH的活性明显降低(P <0.05),细胞内SOD活性升高(P <0.05),细胞内线粒体膜电位明显升高(P <0.05),ROS水平降低(P <0.05),核小体片段聚集程度显著降低(P <0.05)。HG组线粒体内抗氧化酶Mn-SOD比NC组降低(P <0.05),但线粒体内凋亡蛋白Cyt C、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平比NC组显著升高(P <0.05),而HG+GEN组与HG组相比,Mn-SOD升高(P <0.05),Cyt C、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平显著降低(P <0.05)。结论:京尼平对高糖损伤的心肌H9c2细胞具有抗氧化保护作用和抑制细胞凋亡的作用。
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