抗弓形虫速殖子单克隆抗体的制备与特性研究

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目的 制备抗弓形虫速殖子单克隆抗体(Mab),并对其特性进行分析,探讨其在弓形虫病诊断中的作用。方法 利用杂交瘤技术制备抗弓形虫速殖子Mab。用间接ELISA法测定活性,以琼脂糖免疫双扩散鉴定亚类,通过SDS-PAGE和Westernblot分析该Mab所识别的抗原分子量,以IFA确定抗原位点在虫体的定位,并对其保护性及特异性进行分析。通过Mab-ELISA法检测弓形虫抗原,以研究其在弓形虫病血清学诊断中的意义。结果 抗弓形虫Mab F7C8H12属IgG1亚类,识别抗原的分子量为16.5和24kDa。以固定的完整虫体进行IFA,未显示荧光。竞争抑制试验显示50%抑制率时的抗原浓度为40μg/ml。将RH株速殖子与Mab腹水进行孵育后接种于小鼠腹腔,并不能延长小鼠的平均死亡时间。以Mab-ELISA法检测人工溶于PBS和正常人血清中的弓形虫RH株速殖子抗原,最小检出量为0.78μg/Ml和L5μg/ml。RH株速殖子108/只感染小鼠,分别于第6d和第8d能检出循环抗原。结论 抗弓形虫速殖子MabF7C8Hl2是研究弓形虫和弓形虫病的很好探针,其应用前景值得进一步研究。
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