【摘 要】
：
目的 研究CRISPR/Cas9基因组编辑系统在不同细胞中编辑效率的差异及相关的影响因素.方法 基于靶向人TCR α链C区(TRAC)基因的CRISPR/Cas9重组载体分别对293T、HEK-293、HeLa
【机 构】
：
广东药科大学生命科学与生物制药学院广东省生物技术候选药物研究重点实验室,广州,510006
论文部分内容阅读
目的 研究CRISPR/Cas9基因组编辑系统在不同细胞中编辑效率的差异及相关的影响因素.方法 基于靶向人TCR α链C区(TRAC)基因的CRISPR/Cas9重组载体分别对293T、HEK-293、HeLa、SW480、Jurkat、K562等细胞进行基因组编辑,检测编辑效率的差异.同时检测p53基因在不同细胞中的突变情况,通过RT-qPCR分析参与非同源末端连接(NHEJ)通路的17个主要基因的表达情况.结果 流式检测各细胞的转染效率:293T为30.50％,HEK-293为29.30％,Hela为17.70％,SW480为21.90％,Jurkat为13.08％,K562为18.51％.根据克隆测序结果计算出各种细胞中基因组的编辑率:293T为74.70％、HEK-293为68.00％、Hela为13.47％、SW480为32.70％、Jurkat为65.52％、K562为77.18％.测序结果表明293T、Jurkat、K562细胞的p53基因发生了突变,而HEK-293、Hela和SW480的p53基因为野生型.qPCR结果显示,在编辑效率较高的细胞系中,大部分NHEJ相关基因的表达水平也较高,且其表达水平在p53功能异常细胞系中要比在p53功能正常细胞系中的高.结论 本研究发现p53的异常程度以及NHEJ相关基因的表达水平与基因组编辑效率存在相关性.
其他文献
目的 研究在关节外科护理工作中引入优质护理服务收到的效果.方法 自2018年1月到2018年6月来我院治疗的关节外科病人中随机选择110人进行研究,引入了优质护理服务措施,并在病
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
湖北省天门市地处江汉平原中部,总人口162万,其中农村人口占65%,每年外出务工人员达32万。该市自2004年发现首例艾滋病病毒(HIV)感染者以来,截至到2009年4月共报告发现HIV/AI
目的:探究分析优质护理对支气管哮喘急性加重期患者治疗效果观察.方法:选取2017.8～2018.9某院收治的支气管哮喘急性加重期患者88例,随机分为A组(常规护理)与B组(优质护理)的2
目的 分析丙戊酸钠鼻饲和口服给药对其血药浓度影响的差异性,以及血药浓度与给药剂量的相关性.方法 回顾性收集南京医科大学附属苏州医院2016年1月至2017年12月期间单药使用
预防接种工作是有效预防控制传染病发生、流行的重要手段,接种率是反映预防接种工作质量的重要指标。对接种率进行监测分析,有利于及时发现工作中存在的问题和薄弱环节〔1〕,
目的:分析儿科呼吸系统疾病的临床护理.方法:从我院选择儿科呼吸系统系统疾病患者220力,将其分为对照组和试验组,对照组主要使用常规的方法进行护理,试验组主要使用科学人性
2001年,武汉市开展了社会捐赠救治晚期血吸虫病(以下简称晚血)活动,2002～2008年,市财政又安排专项经费开展“全市晚血免费救治项目”〔1〕。8年来,共免费救治1634人次(在册805
目的:探究甲硝唑联合头孢曲松治疗急性阑尾炎手术期感染疗效以及护理效果.方法:选择本院收治的急性化脓性阑尾炎患者作为研究对象,采用随机抽样法从中抽选出病例数80例,并以