目的 探讨形觉剥夺对豚鼠锥细胞视蛋白表达的影响.方法 出生1周的豚鼠28只,分为正常对照组和形觉剥夺组,各14只,按自然亮暗周期饲养.形觉剥夺组随机选取一只眼以半透明橡胶遮盖,正常对照组随机选择一眼作为对照.4周后取眼球行RT-PCR检测神经视网膜M-视蛋白和S-视蛋白的mRNA表达,并进行豚鼠视网膜铺片后免疫组织化学方法观察两种视蛋白的分布和表达密度,一抗为兔抗鼠红/绿锥视蛋白抗体或蓝锥视蛋白抗体,二抗为羊抗兔IgG带488荧光抗体.以Leica光学显微镜和Leica共聚焦显微镜观察豚鼠视网膜腹侧(下方)和背侧(上方)及中央区的锥细胞视蛋白的表达.结果 实验前屈光状态为:对照眼(5.63±0.87)D,形觉剥夺处理眼(5.47±1.02)D,4周后屈光状态分别为:对照眼(4.38±1.02)D,形觉剥夺处理眼(-3.03±0.78)D;屈光度的改变分别为:(-1.25+0.53)和(-8.38±1.44)D.正常豚鼠的视网膜短波敏感锥细胞分布为腹侧(下方)多于背侧(上方);中央密度最高,密度变化为突变.豚鼠的中波敏感锥细胞分布在背部(上方)多于腹侧(下方),中央密度最高,密度变化为渐变;正常组短波敏感蛋白的表达密度:下方为(805.0±203.3)mm-2,上方为(100.0±57.7)mm-2;中央为(1637.2±314.1)mm-2.形觉剥夺组:下方为(640.9±196.8)mm-2;中央为:(1016.7±144.6)mm-2,上方为(70.9±30.8)mm-2;正常组M-视蛋白的表达密度:上方为(946.2±388.5)mm-2,中心为(1666.7±137.8)mm-2,下方为(175.0±100.9)mm-2;形觉剥夺组:上方为(1436.7±366.0)mm-2,中心为:(2780.0±180.5)mm-2,下方为(318.2±172.7)mm-2.RT-PCR检测示形觉剥夺眼和对照眼的M-视蛋白的相对吸光度值分别为1.06±0.07和0.51±0.10,S-视蛋白的吸光度值分别为0.70±0.07和1.25±0.06.形觉剥夺性近视眼视网膜3个观察区域M-视蛋白的表达均较正常对照增加,S-视蛋白的表达减少,两因素方差分析示差别均有统计学意义(P＜0.05).结论 形觉剥夺性近视眼M-视蛋白的表达增加,S-视蛋白的表达减少,提示感光细胞锥细胞的视蛋白表达有可能在近视的发生发展中起了作用。
形觉剥夺对豚鼠锥视蛋白表达的影响研究
【摘 要】
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目的 探讨形觉剥夺对豚鼠锥细胞视蛋白表达的影响.方法 出生1周的豚鼠28只,分为正常对照组和形觉剥夺组,各14只,按自然亮暗周期饲养.形觉剥夺组随机选取一只眼以半透明橡胶遮盖,正常对照组随机选择一眼作为对照.4周后取眼球行RT-PCR检测神经视网膜M-视蛋白和S-视蛋白的mRNA表达,并进行豚鼠视网膜铺片后免疫组织化学方法观察两种视蛋白的分布和表达密度,一抗为兔抗鼠红/绿锥视蛋白抗体或蓝锥视蛋白抗
【机 构】
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200031,上海,复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科,200031,上海,复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科,200031,上海,复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科,200031,上海,复旦大学附属眼耳鼻喉科医
【发表日期】
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2007年43期
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