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目的:.将奶牛CSN2.5′端启动子区与人瘦蛋白cDNA序列进行拼接,进而构建人瘦蛋白乳腺特异性表达载体.方法:.设计特殊的"巨型引物",运用PCR方法分别从质粒pBBC和pHL上扩增了牛CSN2.5′端启动子(2.8kb)和有完整读码框的人瘦蛋白基因.利用改进的重叠区扩增基因拼接法(SOEing法),将两个独立的片断进行了拼接.结果:得到了两者线形融合基因,为构建人瘦蛋白乳腺特异性表达载体打下了基础.