【摘 要】
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目的 建立HBV体外感染颗粒细胞模型,研究HBV在颗粒细胞中的复制情况,为深入研究HBV经卵细胞母婴垂直传播提供研究平台.方法 原代颗粒细胞体外培养后用HBV阳性血清感染.收集培
【机 构】
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西安交通大学医学院第一附属医院传染病科,710061
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目的 建立HBV体外感染颗粒细胞模型,研究HBV在颗粒细胞中的复制情况,为深入研究HBV经卵细胞母婴垂直传播提供研究平台.方法 原代颗粒细胞体外培养后用HBV阳性血清感染.收集培养上清,在不同时点检测HBsAg、HBeAg定量,实时定量PCR检测HBVDNA.免疫组化检测培养细胞中的HBsAg和HBcAg.巢式PCR检测细胞中的HBVDNA及HBV - mRNA.原位杂交检测细胞内的HBVDNA.结果 成功建立了HBV体外感染颗粒细胞模型,在培养上清中可以持续96h检测到HBsAg和HBV DNA,在细胞内检测到HBsAg和HBcAg的阳性信号,PCR扩增显示细胞内有HBVDNA及HBV - mRNA的存在,原位杂交证实细胞内HBVDNA阳性.结论 HBV能够在体外感染颗粒细胞,并在其内复制,该结果为深入研究HBV经卵细胞传播机制提供了很好的研究平台.
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