大肠杆菌色氨酸酶的制备及酶学性质

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以硫酸铵沉淀法分离提取大肠杆菌色氨酸酶,进行色氨酸酶学性质检测及动力学初步探讨。结果表明:使用50℃水浴法进行细胞壁的破碎,提取粗TPase酶液效果较好;(NH4)2SO4粗提色氨酸酶有较好效果;色氨酸酶的最佳反应pH值为8.0,在pH5.5~7.5较稳定;最高耐受温度65℃,最佳反应温度45℃;K+、NH4+能够明显地提高色氨酸酶活性,而Na+则明显地抑制酶活性。对色氨酸酶的动力学研究表明,在相同反应条件下,针对底物L-丝氨酸的米式常数Km值远远大于吲哚的Km值。
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