乳鼠成骨细胞酵母双杂交cDNA文库构建

来源 :中国骨质疏松杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：a30355115

【摘要】

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目的构建乳鼠成骨细胞的酵母双杂交cDNA文库。方法用TRIzol法提取乳鼠成骨细胞总RNA，按照SMART cDNA Library Construction Kit （CLONTECH）说明书反转录合成双链cDNA，Spin Column

【作者】

：

林振江建明袁亮冯瑞强付兆宗孟越杨德鸿

【机构】

：

南方医科大学南方医院

【出处】

：

中国骨质疏松杂志

【发表日期】

：

2013年9期

【关键词】

：

成骨细胞 CDNA文库酵母双杂交

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目的构建乳鼠成骨细胞的酵母双杂交cDNA文库。方法用TRIzol法提取乳鼠成骨细胞总RNA，按照SMART cDNA Library Construction Kit （CLONTECH）说明书反转录合成双链cDNA，Spin Column去除短片段，然后用同源重组的方法将双链cDNA和PGADT7-rec载体共转化到酵母细胞Y187中，建立文库并计算文库滴度。结果提取的总RNA的A260／A280为1．99，琼脂糖凝胶电泳示28SrRNA、18SrRNA2条带，且28S与18S带亮度比值约为2。酵母文库

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