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目的
探索一种应用于肝纤维化不同阶段小鼠的肝星状细胞(HSCs)分离方法。
方法联合肝脏原位灌注胶原酶、离体消化、细胞梯度密度离心等方法，分离获取小鼠原代HSCs；采用形态学观察及细胞自发荧光检测，进行细胞纯度鉴定；利用锥虫蓝染色进行细胞活力评估；应用免疫荧光染色，对HSCs活化状态进行检测。
结果通过本方法，从正常小鼠可获得1.14× 106个HSCs，纯度达95.7%，活力为92.8%；从肝纤维化不同阶段小鼠可获得1.85×106个HSCs，纯度达90.6%，活力为97.3%；分离所得的HSCs均可于体外继续培养及活化。
结论基于梯度密度离心的改良法简便高效，适用于肝纤维化不同阶段小鼠肝星状细胞的分离与培养。