【摘 要】
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目的制备石房蛤毒素(STX)的单克隆抗体,利用时间分辨荧光免疫分析技术建立石房蛤毒素超微量的检测方法。方法利用STX-KLH偶联抗原免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合,筛
【机 构】
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广州市疾病预防控制中心; 广州市达瑞抗体工程技术有限公司;
【基金项目】
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广州市医药卫生科技项目(2012A011118);广州市医药卫生科技重点项目(20121A021018);广州市科技计划项目(2011J4100040)
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目的制备石房蛤毒素(STX)的单克隆抗体,利用时间分辨荧光免疫分析技术建立石房蛤毒素超微量的检测方法。方法利用STX-KLH偶联抗原免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合,筛选后获得稳定分泌抗STX抗体的杂交瘤细胞株,腹水诱生法制备大量单抗,采用间接竞争法建立STX-TRFIA时间分辨荧光免疫检测试剂盒,对试剂盒各项性能进行评价。结果该试剂盒最低检出浓度为1.0 ng/ml,校准曲线线性范围为2.0~512 ng/ml,线性方程Y=-0.455 7X+22.872(|r|=0.998 3),与腹泻性贝类毒素(DSP)、神经毒性贝类毒素(NSP)、失忆性贝类毒素(ASP)均无交叉反应,平均回收率为94.66%,与进口试剂盒同时检测广州市水产品中贝类毒素的含量,其相关系数为0.9764,P<0.001。结论试剂盒各项指标均接近进口试剂盒水平,达到检验要求,可满足实际工作需要。
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