变形链球菌耐氟菌株耐酸相关基因ropA的克隆及蛋白表达

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【摘要】

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克隆并表达变形链球菌耐氟菌株耐酸相关基因ropA。以变形链球菌UAl59的耐氟菌株全基因组为模版，PCR扩增ropA基因并与pMD-18T克隆载体连接构建重组克隆质粒，测序鉴定。BamHI、觑

【作者】

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超博张红李文月邵思奇张志民

【机构】

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吉林大学口腔医学院牙体牙髓病科

【出处】

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微生物学杂志

【发表日期】

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2017年4期

【关键词】

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克隆并表达变形链球菌耐氟菌株耐酸相关基因ropA。以变形链球菌UAl59的耐氟菌株全基因组为模版，PCR扩增ropA基因并与pMD-18T克隆载体连接构建重组克隆质粒，测序鉴定。BamHI、觑ndⅢ双酶切重组克隆质粒，回收目的基因片段并与pProEXHTa表达栽体通过粘性末端连接构建重组表达质粒，转化入大肠埃希菌感受态细胞DH5α，IPTG诱导，SDS-PAGE检测RopA表达量。测序结果为变形链球菌UAl59的耐氟菌株ropA基因碱基序列与亲代菌株UAl59完全一致。SDS-PAGE结果显示IPTG成功

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