【摘 要】
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目的：构建带GST标签的Akt1原核表达载体,获得GST-Akt1原核表达蛋白,并进行体外激酶实验验证其能否发生磷酸化修饰.方法：以乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出Akt1编码序列,将其
【机 构】
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大连医科大学,军事医学科学院生物工程研究所,首都师范大学,2.军事医学科学院生物工程研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金（81572382）
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目的：构建带GST标签的Akt1原核表达载体,获得GST-Akt1原核表达蛋白,并进行体外激酶实验验证其能否发生磷酸化修饰.方法：以乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出Akt1编码序列,将其插入pGEX-KG载体,鉴定正确后转化大肠杆菌Rossate诱导表达,纯化蛋白后进行体外激酶实验,检测得到的蛋白是否可以发生磷酸化修饰.结果：双酶切和测序结果表明GST-Akt1原核表达质粒构建成功,考马斯亮蓝染色结果表明GST-Akt1蛋白获得表达,体外激酶实验表明GST-Akt1蛋白可发生磷酸化修饰.结论：构建了带
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