【摘 要】
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目的:观察地参多糖(LLP)的体外抗肿瘤活性及机制.方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测LLP(0,5,10,15,20 g·L-1)对A549细胞不同作用时间(24,48,72 h)的增殖抑制作用;采用细胞划痕,transwell实验检测LLP(10,20 g·L-1)作用24,48 h后A549细胞的迁移侵袭能力;碘化丙啶(PI)单染法检测LLP(10,20 g·L-1)对A549细胞周期的影响;异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/PI凋亡试剂盒检测LLP(10,20 g·L-1)诱
【机 构】
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大理大学基础医学院,云南大理671000;大理大学基础医学院,云南大理671000;云南省昆虫生物医药研发重点实验室,云南大理671000
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目的:观察地参多糖(LLP)的体外抗肿瘤活性及机制.方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测LLP(0,5,10,15,20 g·L-1)对A549细胞不同作用时间(24,48,72 h)的增殖抑制作用;采用细胞划痕,transwell实验检测LLP(10,20 g·L-1)作用24,48 h后A549细胞的迁移侵袭能力;碘化丙啶(PI)单染法检测LLP(10,20 g·L-1)对A549细胞周期的影响;异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/PI凋亡试剂盒检测LLP(10,20 g·L-1)诱导A549细胞的凋亡作用;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测LLP(10,20g·L-1)对A549细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-8(Caspase-8),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9),细胞周期依赖性激酶-1(CDK-1),细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)mRNA表达的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测LLP对A549细胞中Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),CDK-1,细胞周期依赖性激酶4(CDK-4),细胞周期依赖性激酶-6(CDK-6),CyclinB1,细胞周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白表达的影响.结果:与空白组比较,LLP组A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力均降低(P<0.05,P<0.01);DNA合成准备期/DNA合成前期(G0/G1期)比例升高(P<0.05);凋亡率升高(P<0.05,P<0.01);Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9 mRNA 表达水平升高(P<0.05,P<0.01),CDK-1,Cyclin B,mRNA 表达水平降低(P<0.05,P<0.01);Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9,Bax 蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),Bcl-2,CDK-1,CDK-4,CDK-6,Cyclin B1,Cyclin D1蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01).结论:LLP可抑制A549细胞的增殖,使其周期阻滞在G0/G1期,同时可能包含DNA合成后期/DNA分裂期(G2/M期),并通过线粒体凋亡途径和死亡受体途径诱导细胞凋亡.
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目的:钩吻配伍玉叶金花对外排转运蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和细胞色素P450 3A11(CYP3A11)的影响,探讨其配伍减毒的机制;同时添加核受体激活剂干预探讨核受体是否在该过程中有调节作用.方法:将C57BL/6小鼠分为空白组,钩吻组(GE组,0.25g·kg-1),钩吻配伍玉叶金花组(GE+MP组,0.25g·kg-1+10g·kg-1),钩吻+孕烷X受体(PXR)激活剂(利福平)组(GE+Rif组,0.25g·kg-1+50 mg·kg1),配伍+利福平组(GE+MP+Rif组,0.25g·k
目的:观察补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道黏液高分泌及Notch信号通路相关蛋白Notch3,HES家族发状分裂相关增强子1(HES1)的影响,探讨其作用机制.方法:将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、补肺益肾方组和氨茶碱组,每组12只.第1~12周,采用香烟烟雾暴露联合反复细菌感染方法制备COPD稳定期大鼠模型;第13~20周,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,治疗组给予相应药物灌胃(补肺益肾方组3.7g·kg-1·d-1,氨茶碱组54mg·kg-1·d-1).第20周灌胃结束后取材,
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脑梗死在脑血管疾病中最为常见,随着社会的老龄化和不良生活习惯,成为严重危害人类健康的重大疾病.西药阿替普酶静脉溶栓作为脑梗死早期溶解血栓,通过静脉溶栓治疗的最佳时机,是血流再通的最有效的治疗方式,目前被广泛应用于医院治疗脑梗死的急救.中医是依据患者的病史资料及临床表现给予辨证治疗,常见不同证型的脑梗死,如有气虚血瘀证应采用益气活血化瘀方;痰瘀阻络证应采用化痰通络方;肝风内动证应采用平肝熄风方;痰蒙清窍证应采用醒神开窍方;肝阳暴亢证应采用平肝潜阳方.
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