【摘 要】
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目的应用简并引物RT-PCR扩增并克隆TF-ⅢA型锌指蛋白基因表达序列标签(EST),以最终获得新的锌指蛋白基因.方法分别用TPA和Hemin诱导人红白血病(HEL)细胞,提取总RNA.根据Ⅱ-Ⅲ
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,中国医学科学院中
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目的应用简并引物RT-PCR扩增并克隆TF-ⅢA型锌指蛋白基因表达序列标签(EST),以最终获得新的锌指蛋白基因.方法分别用TPA和Hemin诱导人红白血病(HEL)细胞,提取总RNA.根据Ⅱ-ⅢA型锌指蛋白保守序列设计简并引物,并以之进行RT-PCR扩增,然后将其克隆到pGEM-T easy载体中测序,应用DNAsis软件分析序列并通过GenBank blast进行序列比较.结果克隆并测序了30个扩增片段,22个是锌指蛋白基因的EST,其中17个是新的锌指蛋白基因EST.结论应用简并引物RT-PCR克隆
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