【摘 要】
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目的 基于“特发性肺纤维化患者存在肺络干血”假说,观察大黄麈虫丸含药血清对TGF-β1干预后A549细胞EMT及Smad2,Collagen Ⅰ表达的影响,探讨其防治特发性肺纤维化(IPF)的作用机制.方法 正常培养并取对数生长期A549细胞,TGF-β1对其干预48 h,电子显微镜下观察A549细胞的形态学变化;选择吡非尼酮作为阳性对照药,RT-PCR法检测EMT相关基因及Smad2 mRNA的表达;Western blot法检测Smad2、p-smad2、Collagen Ⅰ蛋白表达.结果 成功获取发
【机 构】
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北京中医药大学东直门医院,北京100029
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目的 基于“特发性肺纤维化患者存在肺络干血”假说,观察大黄麈虫丸含药血清对TGF-β1干预后A549细胞EMT及Smad2,Collagen Ⅰ表达的影响,探讨其防治特发性肺纤维化(IPF)的作用机制.方法 正常培养并取对数生长期A549细胞,TGF-β1对其干预48 h,电子显微镜下观察A549细胞的形态学变化;选择吡非尼酮作为阳性对照药,RT-PCR法检测EMT相关基因及Smad2 mRNA的表达;Western blot法检测Smad2、p-smad2、Collagen Ⅰ蛋白表达.结果 成功获取发生EMT的A549细胞;以Fibronectin mRNA表达情况判断EMT程度由高到低依次为:模型组(M),大黄(廑)虫丸含药血清大剂量组(D),大黄(廑)虫丸含药血清中剂量组(Z),西药组(P),大黄(廑)虫丸含药血清小剂量组(X),空白对照组(K);作为细胞外基质(EMC)重要成分,与M相比,Z与X中Collagen Ⅰ表达显著降低(P＜0.01),亦较接近K中表达(P＞0.05);与M相比,X中Smad2表达显著降低(P＜0.01),P与Z中Smad2表达降低(P＜0.05),且表达值均接近K(P＞0.05);与M相比,D、Z、X中Smad2 mRNA及p-smad2表达均显著降低(P＜0.01),但与K中表达值亦有显著差异(P＜0.01).结论 大黄(廑)虫丸对TGF-β1干预后A549细胞发生EMT程度及Smad2,Collagen Ⅰ的表达有影响,推测大黄(廑)虫丸对IPF的保护机制可能与不同程度阻断或逆转了TGF-β1/Smad2介导的EMT有关.
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