目的:对无菌药品洁净区生产环境发现的微生物进行菌种鉴定和种群分析,初步建立环境微生物数据库,为微生物的溯源调查和污染控制提供科学依据,确保药品的安全。方法:对冻干粉针剂生产车间B级洁净区动态监测发现的148株菌株进行分离纯化,通过菌体收获、皂化、甲基化、萃取、碱洗涤提取脂肪酸,采用MIDI Sherlock全自动微生物鉴定系统进行鉴定和种群分析。结果:148株分离菌株分属于15个属31个种,出现频次较高的属依次为葡萄球菌属、微球菌属和节杆菌属,三个属的菌种出现的频次占全部分离菌株的77.7%。在所有分离菌株中,出现频次较高的菌株依次为藤黄微球菌、科氏葡萄球菌、人葡萄球菌、克氏葡萄球菌和变金黄节杆菌,这5种细菌出现的频次占全部分离菌株的69.0%。结论:在洁净区环境监测中,发现较高频次的是以人源性葡萄球菌属、微球菌属等为主的菌株,因此,规范进入洁净区的人员行为规范和采用科学合理的清洁消毒程序,将有助于减少由人员导致的微生物污染。