【摘 要】
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旨在获得美洲大蠊i型溶菌酶Pa I的原核表达蛋白,并制备鼠抗Pa I多克隆抗体。PCR扩增Pa I成熟肽编码序列,构建原核表达载体p ET28a-Pa I,诱导表达、纯化Pa I-His融合蛋白,免疫
【机 构】
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贵州医科大学生物与工程学院,贵州医科大学基础医学院
【基金项目】
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贵州省科技合作计划项目(黔科合LH字[2015]7336号);贵阳市科技计划项目(筑科合同[20151001]社19号);贵州省科技基金项目(黔科合LH字[2014]7085号);贵州省教育厅自然科学研究项目(黔教合KY字[2012]039号)
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旨在获得美洲大蠊i型溶菌酶Pa I的原核表达蛋白,并制备鼠抗Pa I多克隆抗体。PCR扩增Pa I成熟肽编码序列,构建原核表达载体p ET28a-Pa I,诱导表达、纯化Pa I-His融合蛋白,免疫Balb/c小鼠,间接ELISA法检测抗血清效价,Western blotting检测多克隆抗体的特异性。结果显示,Pa I成熟肽部分的编码序列长414 bp,由137个氨基酸组成。构建的原核表达载体p ET28a-Pa I在大肠杆菌Rosetta（DE3）中成功表达,SDS-PAGE检测显示纯化的Pa I-
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