B细胞受体核心岩藻糖基化调节成熟B细胞的信号转导

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目的 探讨核心岩藻糖基转移酶(Fut8)对成熟B细胞信号转导的影响。方法 利用Fut8-siRNA逆转录病毒载体建立Fut8基因沉默成熟B细胞株(3-83-KD细胞),并将PLHCX-Fut8质粒导入3-83-KD细胞建立Fut8基因恢复成熟B细胞株(3-83-KD-Re)。用Realtime-PCR、Western blot和HPLC法检测Fut8mRNA、蛋白表达和Fut8酶活性,流式细胞仪和凝集素免疫印迹检测BCR的表达量和核心岩藻糖基化水平,Western blot技术检测细胞内酪氨酸磷酸化水平。
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