I群禽腺病毒五邻体基因的克隆及原核表达

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根据GenBank中I群禽腺病毒(AAV)基因组序列,设计了1对特异性引物。以CELO毒株基因组DNA为模板,通过PCR扩增出结构蛋白五邻体基因(penton),将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1的Eco R I和XhoI位点,构建了原核表达载体pGEX-penton。将其转化到感受态细胞DH5d中,经IPTG诱导,SDS—PAGE分析,获得了45.9ku的融合蛋白。用不同的IPTG浓度和时间诱导表达,得出诱导的最佳IPTG浓度为1.5mmol/L,最佳时间为4h。用尿素提取包涵体表达产物,得到pe
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