区分禽流感病毒亚型诊断基因芯片的构建

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制备了可同时区分AIVH5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因诊断芯片。试验以重组质粒为模板.进行PCR扩增,然后用异丙醇沉淀法进行纯化,制备探针及内参基因。将探针及内参基因用点样缓冲液稀释到0.3ug/uL后用芯片点样仪将其点制到醛基化基片上,样点中心间距450um,样点直径220um。将点好的基片在室温干燥24h以上,后经65℃再水合10s、80℃干燥、65面紫外线交联照射25min后,再用封闭液封闭。95℃变性处理,成功构建了能区分禽流感血凝素H5,H7,H9亚型及神经氨酸酶N1.
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