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目的
研究Wntless (Wls)介导的Wnt信号通路对棕色脂肪组织(BAT)发育分化及能量代谢的影响。
方法运用Cre-loxP系统，在Myf5＋的棕色脂肪前体细胞敲除Wls基因。取敲除小鼠WlsMyf5Δ/Δ和Wlsfl/fl对照小鼠的BAT进行形态观察、免疫组化分析、实时定量PCR以及Western印迹检测，观察其细胞分化状态；取BAT的血管基质部分(SVF)细胞进行体外棕色化诱导、油红O染色、实时定量PCR和细胞呼吸实验，分析细胞体外分化潜能和氧耗水平；对小鼠进行红外热成像，测定肛温以及氧耗呼吸代谢，分析小鼠产热和能量代谢状态；对小鼠进行核磁共振体脂检测，葡萄糖和胰岛素耐量试验，检测小鼠脂肪含量和糖代谢能力。
结果Wls基因敲除小鼠体型偏小，体重偏轻，瘦脂比升高，棕色脂肪组织体积较小，背部体温升高；敲除小鼠BAT的分化增强，产热增加，解耦联蛋白1(Ucp1)的mRNA和蛋白表达水平上升，其SVF细胞体外棕色化明显增强；敲除小鼠体脂量下降，糖代谢能力升高，但整体氧耗呼吸能量代谢没有明显变化。
结论Wls介导的Wnt信号通路能通过抑制小鼠棕色脂肪组织分化，降低其产热和葡萄糖代谢。