【摘 要】
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目的探讨骨髓间充质干细胞培养及高压氧对其增殖分化的影响。方法采用全骨髓细胞贴壁培养法提取绿色荧光蛋白小鼠骨髓间充质干细胞进行培养,取P3代骨髓间充质干细胞,用神经节苷脂和胶质细胞源性神经生长因子诱导液进行成神经元样细胞诱导,并在培养及诱导时进行高压氧干预,1次/d,为高压氧干预组(高压氧组)。采用免疫荧光检测神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase, NSE)表达,绘制
【机 构】
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目的探讨骨髓间充质干细胞培养及高压氧对其增殖分化的影响。
方法采用全骨髓细胞贴壁培养法提取绿色荧光蛋白小鼠骨髓间充质干细胞进行培养,取P3代骨髓间充质干细胞,用神经节苷脂和胶质细胞源性神经生长因子诱导液进行成神经元样细胞诱导,并在培养及诱导时进行高压氧干预,1次/d,为高压氧干预组(高压氧组)。采用免疫荧光检测神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase, NSE)表达,绘制细胞生长曲线。未进行高压氧干预的为对照组。
结果贴壁培养法分离培养骨髓间充质干细胞,经多次换液后可纯化细胞。高压氧组间充质干细胞对数生长期提前,进入平台期后细胞数量多于对照组,高压氧干预后细胞于24 h内出现轴突、树突,48 h后2组对比,高压氧组80% 以上细胞出现突起,且细胞突起较长、较粗。对照组突起的细胞比例不足80%,细胞分散,突起短,未连成网状。
结论骨髓间充质干细胞全骨髓贴壁培养法操作简单,细胞繁殖能力强,经高压氧干预后骨髓间充质干细胞生长加快。在细胞诱导时联合高压氧干预,细胞分化数量多,突起长。提示高压氧能促进体外骨髓间充质干细胞向神经元样细胞增殖和分化。
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