【摘 要】
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目的：探讨参桃软肝方抗肝癌的作用及机制。方法：MTT（Methyl thiazolyl tetrazolium:四甲基噻唑蓝）法检测参桃软肝方对人肝癌细胞HepG2活性及PI3K/Akt/MAPK（Phosphatidylinositol-3-kinase:胞内磷脂酰肌醇激酶 / Protein Kinase B:蛋白激酶B / mitogen-activated protein kinase:丝
【机 构】
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广州中医药大学深圳医院(福田)肿瘤科
【基金项目】
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广东省中医药管理局面上项目：参桃软肝方调控肝癌细胞焦亡机制研究（20211335），负责人：黄海福； 深圳市福田区公益性重点项目：“参桃软肝丸”干预肝癌高危人群的疗效观察（FTWS2020015），负责人：黄海福；
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目的：探讨参桃软肝方抗肝癌的作用及机制。方法：MTT（Methyl thiazolyl tetrazolium:四甲基噻唑蓝）法检测参桃软肝方对人肝癌细胞HepG2活性及PI3K/Akt/MAPK（Phosphatidylinositol-3-kinase:胞内磷脂酰肌醇激酶 / Protein Kinase B:蛋白激酶B / mitogen-activated protein kinase:丝裂原活化蛋白激酶）抑制剂（LY294002、Akti（Akt Inhibitor:Atk抑制剂）、MEKi（MEK Inhibitor：分裂原活化抑制剂））、JNKi（c-Jun N-terminal protein kainse Inhibitor：c-Jun氨基末端蛋白激酶抑制剂）、凋亡抑制剂（Z-VAD）、自噬抑制剂（Wortmanin）、铁死亡抑制剂（Ferrostatin-1）、细胞坏死抑制剂（Necrostatin-1）对参桃软肝方抑制人肝癌细胞HepG2活性的影响；LDH（lactate dehydrogenase：乳酸脱氢酶）法检测参桃软肝方对人肝癌细胞HepG2的毒性作用；Real-time PCR（实时荧光定量）检测参桃软肝方对人肝癌细胞HepG2焦亡标志物IL-1β（Interleukin-1β：白介素1β）的影响；Western blot（蛋白质印迹法）检测参桃软肝方对人肝癌细胞HepG2中Akt/ERK信号通路关键蛋白Akt、ERK、P-ERK蛋白表达的影响，凋亡信号通路关键蛋白Caspase 3（半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶）、PARP（聚腺苷二磷酸核糖聚合酶）、Bcl2（B细胞淋巴瘤/白血病-2基因）、Bax（Bcl2-Associated X的蛋白质），细胞焦亡标志物Cleavaged Caspase-1（卵裂半胱天冬酶1）蛋白表达的影响。结果：参桃软肝方及醇提上清和沉淀都能有效抑制人肝癌细胞HepG2的活性（P＜0.05），LY294002、Wortmanin、Akti、MEKi、JNKi、Z-VAD、Ferrostatin-1、Necrostatin-1对参桃软肝方、醇提上清和沉淀抑制人肝癌细胞HepG2活性没有显著的影响；参桃软肝方促进人肝癌细胞HepG2中LDH的释放，引起细胞毒性；参桃软肝方抑制人肝癌细胞HepG2焦亡标志物IL-1β和Cleavaged Caspase-1的表达；参桃软肝方降低人肝癌细胞HepG2中Akt的蛋白表达，升高Caspase3蛋白表达量。结论：参桃软肝方具有抑制肝癌细胞活性，抗肝癌的作用，其作用机制可能与自噬、坏死性凋亡等程序性死亡方式及PI3K/Akt/MAPK信号传导无关；能抑制Akt的表达和促进Caspase3表达有关。同时，能降低焦亡标志物IL-1β和Cleavaged Caspase-1表达，很可能通过阻断细胞焦亡过程起作用的。参桃软肝方抗肝癌活性优于总提物醇提上清和沉淀，醇提上清和沉淀很可能存在协同抗肝癌的作用。
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