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摘要 采用NY/T761—2008中蔬菜农药残留检测的前处理方法，对结球甘蓝和香菇2种常见蔬菜基质样品进行加标，通过气相色谱仪考察在相同添加浓度的条件下，农药残留的回收率差异；通过添加不同浓度，比较2种样品在不同加标浓度下的回收率。结果表明，在采用NY/T761—2008中样品前处理方法时，10种参数在不同基质中都有理想的回收率，能达到理想的检测效果。通过分析不同参数添加到不同基质中的回收率，发现基质效应对农残检测中农药残留的回收率有一定影响。其中，有机磷参数的回收率受基质影响较大，有机氯参数则不明显，这对实际检测有一定的指导意义。
关键词 农药残留；基质；回收率
中图分类号 S481 .8 文獻标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）17-0116-02
Effects of Different Substrates on Recovery Rate in Pesticide Residue Detection
ZHANG Leng-si DING Li-tong YI Qun-ying CHEN Meng-jing SHEN Qing-long
（Agricultural Quality Supervision and Testing Center of Yancheng City，Yancheng Jiangsu 224002）
Abstract In this paper，NY/T761—2008 was used as a vegetables pretreatment method in pesticide residues detection，two kinds of common vegetable substrate samples of cabbage and mushrooms were spiked.The gas chromatograph was used to investigate the difference in the recovery of pesticide residues under the same concentration.The results showed that when using NY/T761—2008 as a sample pretreatment method，10 parameters in different substrates had an ideal recovery rate.The experiment could achieve the desired detection results.By analyzing the recovery rates of different parameters added to different substrates，it was found that the matrix effect had a certain effect on the recovery rate of pesticides.In this experiment，it was found that the recovery rate of organophosphorus parameters had a greater influence on the substrate，and the organochlorine parameters were not obvious，which had certain guiding significance for the actual detection.
Key words pesticides residues；substrate；recovery rate
随着时代的发展和社会的进步，人们对健康的生活质量有越来越高的要求，同时随着信息时代的发展，越来越多的食品安全问题被曝光，让人们对食品的质量安全越来越重视，国家有关部门也顺应广大群众的要求，不断加大对食品安全的监测力度。随着检测标准的不断完善，对农药残留检测的精度要求也在不断提高，对农产品检测人员检测技术要求也在提高，这也是农药残留检测技术不断进步和发展的动力[1]。食品中农药残留分析检测是保证食品安全的重要手段，同时这也是农药殘留分析领域的一个重要研究课题。由于农药品种广，用途千差万别，人们日常食用的蔬菜、水果种类丰富，针对单一类型农药、单一样品的分析方法已很难适应目前我国食品安全的检测分析要求。因此，目前均使用统一的前处理方法，对蔬菜、水果样品进行前处理。由于蔬菜、水果本身的特性不同、脂肪含量不同、pH值不同，研究使用一种前处理方法处理不同样品是否有着相似的检测结果；对不同的农药参数而言，同一前处理方法处理的不同基质是否会有不同的回收率；不同的蔬菜样品之间，相同参数回收率是否有明显差别，在实际的农产品农药残留检测工作中有着重要意义[2]。
本文使用结球甘蓝和香菇作为基质，采用《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药残留的测定》（NY/T761—2008）中的前处理方法，对基质样品进行加标，通过气相色谱仪，考察不同蔬菜对农药残留回收率的影响，为更好地进行农药残留检测提供相应的试验依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
试验仪器：气相色谱仪（Agilent 7890A），IKAT20均质器，恒温水浴锅，氮吹仪。试验药剂：农药标准物质（100 mg/kg，农业部环境保护科研监测所）、乙腈、丙酮（色谱纯）、正己烷（色谱纯）、氯化钠（分析纯）、FL柱（Agilent公司）。
1.2 标准溶液的配置
农药混合标准溶液的配置：准确吸取一定浓度的标准溶液加入10 mL容量瓶中定容，有机氯农药使用正己烷定容，有机磷农药使用丙酮定容，配制成浓度为10 mg/kg的标准溶液储备液备用（放置于-20 ℃冰箱中储存）。使用时，分别使用正己烷或丙酮将标准储备液稀释至0.200 0、0.100 0、0.050 0、0.025 0、0.012 5 mg/kg 5个浓度梯度的标准工作液上机运行[3]。 1.3 样品前处理
根据NY/T761—2008要求，精确称取粉碎好的样品25.0 g于250 mL烧杯中，加入50 mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min，后用滤纸过滤到装有11 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，等收集滤液30～45 mL，盖上塞子，剧烈震摇1 min，在室温下静置30 min，使乙腈和水相分层。
准确分取第1份上层10.0 mL提取液，放入50 mL烧杯中，将烧杯在60 ℃水浴中蒸发近干，用5.0 mL丙酮定容，样品浑浊的，用0.22 μm有机膜过滤，用于测定有机磷相关参数[4]。
准确移取第2份10.0 mL提取液，放入50 mL烧杯中，将烧杯放在50 ℃水浴中加热，缓缓通入氮气，蒸发近干，用弗罗里硅柱净化。净化过程：用5 mL丙酮 正己烷（1 9）、5 mL丙酮淋洗液对弗罗里硅柱进行预淋洗，用2 mL正己烷把烧杯中样品溶解，转移至活化过的弗罗里硅柱，用5 mL丙酮 正己烷（1 9）冲洗烧杯后淋洗弗罗里硅柱，并重复1次。收集洗脱液，将收集的洗脱液放置在50 ℃氮吹仪上氮吹至低于5 mL，用正己烷定容至5 mL，在涡旋混合器上混匀，装瓶，用于检测有机氯相关参数[5]。
1.4 分析条件
DB-17毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm，Agilent），载气为氮气，FPD检测器温度250 ℃，使用气体：氢气75 mL/min，压缩空气100 mL/min；恒流模式，流速1.0 mL/min；进样口温度250 ℃；进样量1 μL，进样方式：不分流；柱温箱升温程序：在110 ℃以10 ℃/min升温到190 ℃，保持4 min，再以4 ℃/min升温至240 ℃恒温10 min，共34.5 min。
HP-5毛细管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm，Agilent），载气为氮气，恒流模式，流速1.0 mL/min；进样口温度250 ℃；进样量1 μL，进样方式：不分流；柱温箱升温程序：在130 ℃保持2 min，以4.5 ℃/min升温到260 ℃，恒温11 min，共41.889 min。
2 结果与分析
2.1 农药种类
选择已经登记可用于蔬菜和水果上、可以使用气相色谱法进行测定的农药，这些农药检测参数共10个，分别为乙酰甲胺磷、氧乐果、灭线磷、甲拌磷、乐果、百菌清、腐霉利、联苯菊酯、氯氟氰菊酯、溴氰菊酯，属于常用农药或部分禁用农药。
2.2 对比不同基质中农药残留回收率差别
以结球甘蓝和香菇为基质分别向其中加入不同浓度的混合标准溶液，添加浓度分别为0.06、0.12 mg/kg，样品使用NY/T761—2008中的方法进行前处理后，检测各个参数加标回收结果如表1、2所示。
可以看出，有機磷检测参数在香菇和结球甘蓝2种基质中添加回收率相差较大，例如：乙酰甲胺磷参数在香菇中添加回收率分别为80.0%和89.2%，在结球甘蓝中的添加回收率分别为57.1%和50.0%，回收率相差近30%；氧乐果参数在香菇中添加回收率分别为123.5%和114.2%，而在结球甘蓝中添加回收率仅为64.1%和49.5%；相似的參数还有灭线磷和甲拌磷。这些参数都表现为在香菇中回收率在70%～130%之间。而在结球甘蓝中的回收率下降为30%～80%之间。所测有机磷参数中只有乐果在2种不同基质中回收率相近，都在90%～110%之间。
有机氯参数在2种基质中回收率几乎趋于一致，除百菌清外都在70%～130%之间。百菌清在香菇基质中的回收率分别为65.0%和54.8%，在结球甘蓝基质中的回收率分别为 55.0%和66.8%，回收率都偏低。联苯菊酯和溴氰菊酯在香菇基质中回收率都偏高，都在120%左右，其在结球甘蓝基质中检测值更加接近添加值。参数氯氟氰菊酯在香菇基质中回收率在75%左右，在结球甘蓝基质中回收率在100%左右。
3 结论与讨论
试验结果表明，大部分参数在NY/T761—2008作为蔬菜中农药残留前处理方法时有理想的回收率，能达到理想的检测效果。通过分析不同参数添加到不同基质中的回收率，发现基质效应对农药参数的回收率有一定影响。本试验发现，有机磷参数的回收率受基质影响较大，有机氯参数则不明显，这对实际检测有着一定的指导意义。其中，乙酰甲胺磷、氧乐果、灭线磷、甲拌磷等参数在不同基质中回收率相差较大，在日常实验室检测工作中需要谨慎处理，为了保证检测结果的准确性，需要使用与检测样相同品种的基质样品进行加标，通过基质样品的回收率对检测结果进行确认[6]。
4 参考文献
[1] 仲维科，郝戬，樊耀波，等.食品农药残留分析进展[J].分析化学评述与进展，2000，28（7）：904-910.
[2] 王大宁，董益阳，邹明强.农药残留检测与监控技术[M].北京：化学工业出版社，2006：18-21.
[3] WANG J，CHOW W，CHEUNG W.Application of a tandem mass spectrometer and core-shell particle column for the determination of 151 pesticides in grains[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2011， 59（16）：8589-8608.
[4] 达晶，王刚力，曹进，等.农药残留检测标准体系概述及其分析方法进展[J].药物分析杂志，2014，34（5）：760-769.
[5] 熊琳，杨博辉，牛春娥，等.食品中农药残留检测前处理技术进展[J].江西农业大学学报，2012，34（5）：940-947.
[6] 季申.中药材中农药残留检测方法研究的进展与展望[J].中国药学杂志，2010，45（17）：1287-1294.
关键词 农药残留；基质；回收率
中图分类号 S481 .8 文獻标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）17-0116-02
Effects of Different Substrates on Recovery Rate in Pesticide Residue Detection
ZHANG Leng-si DING Li-tong YI Qun-ying CHEN Meng-jing SHEN Qing-long
（Agricultural Quality Supervision and Testing Center of Yancheng City，Yancheng Jiangsu 224002）
Abstract In this paper，NY/T761—2008 was used as a vegetables pretreatment method in pesticide residues detection，two kinds of common vegetable substrate samples of cabbage and mushrooms were spiked.The gas chromatograph was used to investigate the difference in the recovery of pesticide residues under the same concentration.The results showed that when using NY/T761—2008 as a sample pretreatment method，10 parameters in different substrates had an ideal recovery rate.The experiment could achieve the desired detection results.By analyzing the recovery rates of different parameters added to different substrates，it was found that the matrix effect had a certain effect on the recovery rate of pesticides.In this experiment，it was found that the recovery rate of organophosphorus parameters had a greater influence on the substrate，and the organochlorine parameters were not obvious，which had certain guiding significance for the actual detection.
Key words pesticides residues；substrate；recovery rate
随着时代的发展和社会的进步，人们对健康的生活质量有越来越高的要求，同时随着信息时代的发展，越来越多的食品安全问题被曝光，让人们对食品的质量安全越来越重视，国家有关部门也顺应广大群众的要求，不断加大对食品安全的监测力度。随着检测标准的不断完善，对农药残留检测的精度要求也在不断提高，对农产品检测人员检测技术要求也在提高，这也是农药残留检测技术不断进步和发展的动力[1]。食品中农药残留分析检测是保证食品安全的重要手段，同时这也是农药殘留分析领域的一个重要研究课题。由于农药品种广，用途千差万别，人们日常食用的蔬菜、水果种类丰富，针对单一类型农药、单一样品的分析方法已很难适应目前我国食品安全的检测分析要求。因此，目前均使用统一的前处理方法，对蔬菜、水果样品进行前处理。由于蔬菜、水果本身的特性不同、脂肪含量不同、pH值不同，研究使用一种前处理方法处理不同样品是否有着相似的检测结果；对不同的农药参数而言，同一前处理方法处理的不同基质是否会有不同的回收率；不同的蔬菜样品之间，相同参数回收率是否有明显差别，在实际的农产品农药残留检测工作中有着重要意义[2]。
本文使用结球甘蓝和香菇作为基质，采用《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药残留的测定》（NY/T761—2008）中的前处理方法，对基质样品进行加标，通过气相色谱仪，考察不同蔬菜对农药残留回收率的影响，为更好地进行农药残留检测提供相应的试验依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
试验仪器：气相色谱仪（Agilent 7890A），IKAT20均质器，恒温水浴锅，氮吹仪。试验药剂：农药标准物质（100 mg/kg，农业部环境保护科研监测所）、乙腈、丙酮（色谱纯）、正己烷（色谱纯）、氯化钠（分析纯）、FL柱（Agilent公司）。
1.2 标准溶液的配置
农药混合标准溶液的配置：准确吸取一定浓度的标准溶液加入10 mL容量瓶中定容，有机氯农药使用正己烷定容，有机磷农药使用丙酮定容，配制成浓度为10 mg/kg的标准溶液储备液备用（放置于-20 ℃冰箱中储存）。使用时，分别使用正己烷或丙酮将标准储备液稀释至0.200 0、0.100 0、0.050 0、0.025 0、0.012 5 mg/kg 5个浓度梯度的标准工作液上机运行[3]。 1.3 样品前处理
根据NY/T761—2008要求，精确称取粉碎好的样品25.0 g于250 mL烧杯中，加入50 mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min，后用滤纸过滤到装有11 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，等收集滤液30～45 mL，盖上塞子，剧烈震摇1 min，在室温下静置30 min，使乙腈和水相分层。
准确分取第1份上层10.0 mL提取液，放入50 mL烧杯中，将烧杯在60 ℃水浴中蒸发近干，用5.0 mL丙酮定容，样品浑浊的，用0.22 μm有机膜过滤，用于测定有机磷相关参数[4]。
准确移取第2份10.0 mL提取液，放入50 mL烧杯中，将烧杯放在50 ℃水浴中加热，缓缓通入氮气，蒸发近干，用弗罗里硅柱净化。净化过程：用5 mL丙酮 正己烷（1 9）、5 mL丙酮淋洗液对弗罗里硅柱进行预淋洗，用2 mL正己烷把烧杯中样品溶解，转移至活化过的弗罗里硅柱，用5 mL丙酮 正己烷（1 9）冲洗烧杯后淋洗弗罗里硅柱，并重复1次。收集洗脱液，将收集的洗脱液放置在50 ℃氮吹仪上氮吹至低于5 mL，用正己烷定容至5 mL，在涡旋混合器上混匀，装瓶，用于检测有机氯相关参数[5]。
1.4 分析条件
DB-17毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm，Agilent），载气为氮气，FPD检测器温度250 ℃，使用气体：氢气75 mL/min，压缩空气100 mL/min；恒流模式，流速1.0 mL/min；进样口温度250 ℃；进样量1 μL，进样方式：不分流；柱温箱升温程序：在110 ℃以10 ℃/min升温到190 ℃，保持4 min，再以4 ℃/min升温至240 ℃恒温10 min，共34.5 min。
HP-5毛细管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm，Agilent），载气为氮气，恒流模式，流速1.0 mL/min；进样口温度250 ℃；进样量1 μL，进样方式：不分流；柱温箱升温程序：在130 ℃保持2 min，以4.5 ℃/min升温到260 ℃，恒温11 min，共41.889 min。
2 结果与分析
2.1 农药种类
选择已经登记可用于蔬菜和水果上、可以使用气相色谱法进行测定的农药，这些农药检测参数共10个，分别为乙酰甲胺磷、氧乐果、灭线磷、甲拌磷、乐果、百菌清、腐霉利、联苯菊酯、氯氟氰菊酯、溴氰菊酯，属于常用农药或部分禁用农药。
2.2 对比不同基质中农药残留回收率差别
以结球甘蓝和香菇为基质分别向其中加入不同浓度的混合标准溶液，添加浓度分别为0.06、0.12 mg/kg，样品使用NY/T761—2008中的方法进行前处理后，检测各个参数加标回收结果如表1、2所示。
可以看出，有機磷检测参数在香菇和结球甘蓝2种基质中添加回收率相差较大，例如：乙酰甲胺磷参数在香菇中添加回收率分别为80.0%和89.2%，在结球甘蓝中的添加回收率分别为57.1%和50.0%，回收率相差近30%；氧乐果参数在香菇中添加回收率分别为123.5%和114.2%，而在结球甘蓝中添加回收率仅为64.1%和49.5%；相似的參数还有灭线磷和甲拌磷。这些参数都表现为在香菇中回收率在70%～130%之间。而在结球甘蓝中的回收率下降为30%～80%之间。所测有机磷参数中只有乐果在2种不同基质中回收率相近，都在90%～110%之间。
有机氯参数在2种基质中回收率几乎趋于一致，除百菌清外都在70%～130%之间。百菌清在香菇基质中的回收率分别为65.0%和54.8%，在结球甘蓝基质中的回收率分别为 55.0%和66.8%，回收率都偏低。联苯菊酯和溴氰菊酯在香菇基质中回收率都偏高，都在120%左右，其在结球甘蓝基质中检测值更加接近添加值。参数氯氟氰菊酯在香菇基质中回收率在75%左右，在结球甘蓝基质中回收率在100%左右。
3 结论与讨论
试验结果表明，大部分参数在NY/T761—2008作为蔬菜中农药残留前处理方法时有理想的回收率，能达到理想的检测效果。通过分析不同参数添加到不同基质中的回收率，发现基质效应对农药参数的回收率有一定影响。本试验发现，有机磷参数的回收率受基质影响较大，有机氯参数则不明显，这对实际检测有着一定的指导意义。其中，乙酰甲胺磷、氧乐果、灭线磷、甲拌磷等参数在不同基质中回收率相差较大，在日常实验室检测工作中需要谨慎处理，为了保证检测结果的准确性，需要使用与检测样相同品种的基质样品进行加标，通过基质样品的回收率对检测结果进行确认[6]。
4 参考文献
[1] 仲维科，郝戬，樊耀波，等.食品农药残留分析进展[J].分析化学评述与进展，2000，28（7）：904-910.
[2] 王大宁，董益阳，邹明强.农药残留检测与监控技术[M].北京：化学工业出版社，2006：18-21.
[3] WANG J，CHOW W，CHEUNG W.Application of a tandem mass spectrometer and core-shell particle column for the determination of 151 pesticides in grains[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2011， 59（16）：8589-8608.
[4] 达晶，王刚力，曹进，等.农药残留检测标准体系概述及其分析方法进展[J].药物分析杂志，2014，34（5）：760-769.
[5] 熊琳，杨博辉，牛春娥，等.食品中农药残留检测前处理技术进展[J].江西农业大学学报，2012，34（5）：940-947.
[6] 季申.中药材中农药残留检测方法研究的进展与展望[J].中国药学杂志，2010，45（17）：1287-1294.