共表达人PUMA和HGF／NK4基因的重组腺病毒的制备及在胰腺癌细胞中的表达

来源 :国际医药卫生导报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sumjoy

【摘要】

：

目的制备同步表达HGF／NK4基因和PUMA基因的重组腺病毒，感染胰腺癌细胞后检测基因的有效表达。方法将PUMA基因和HGF／NK4基因以串联方式依次克隆至腺病毒穿梭载体，构建重组穿梭载体

【作者】

：

黄柏强李二毛孔冠群黄志平

【机构】

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广州市番禺区石楼人民医院,广州医科大学实验医学研究中心,广州市番禺区石楼镇社区卫生服务中心

【出处】

：

国际医药卫生导报

【发表日期】

：

2013年16期

【关键词】

：

腺病毒 NK4 PUMA 胰腺癌 Adenovirus PUMA gene NK4 gene Pancreatic cancer

【基金项目】

：

2012广东省科技厅科技计划项目（01656900179474038）

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目的制备同步表达HGF／NK4基因和PUMA基因的重组腺病毒，感染胰腺癌细胞后检测基因的有效表达。方法将PUMA基因和HGF／NK4基因以串联方式依次克隆至腺病毒穿梭载体，构建重组穿梭载体pAdTrack-PUMA-NK4，转化大肠杆菌BJ5183并在细菌内与腺病毒载体同源重组制备重组腺病毒载体pAd-PUMA-NK4。PacⅠ酶切后转染至HEK293细胞包装得到重组腺病毒。一定滴度的腺病毒感染人胰腺癌细胞株，荧光定量RT-PCR检测细胞中NK4和PUMA基因mRNA表达水平。结果双酶切重组pad-PUM

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