【摘 要】
：
目的:构建2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL蛋白酶的高通量筛选体系,并利用该体系对180种中药提取物进行筛选.方法:针对SARS-CoV-2 3CL蛋白酶进行原核表达和纯化,进而建立基于荧光能量共振转移技术的SARS-CoV-2 3CL抑制剂高通量筛选体系.利用该体系对180种中药提取物进行筛选,并验证活性组分的量效关系.结果:本研究成功构建了SARS-CoV-2 3CL蛋白酶的高通量筛选体系,并筛选得到5种中药提取物(半枝莲乙酸乙酯部位、防风石油醚部位、紫苏叶环己烷部位、紫苏梗环己烷部位
论文部分内容阅读
目的:构建2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL蛋白酶的高通量筛选体系,并利用该体系对180种中药提取物进行筛选.方法:针对SARS-CoV-2 3CL蛋白酶进行原核表达和纯化,进而建立基于荧光能量共振转移技术的SARS-CoV-2 3CL抑制剂高通量筛选体系.利用该体系对180种中药提取物进行筛选,并验证活性组分的量效关系.结果:本研究成功构建了SARS-CoV-2 3CL蛋白酶的高通量筛选体系,并筛选得到5种中药提取物(半枝莲乙酸乙酯部位、防风石油醚部位、紫苏叶环己烷部位、紫苏梗环己烷部位以及紫苏梗乙酸乙酯部位)具有3CL蛋白酶的抑制活性,其半数抑制浓度分别为30.03、20.00、18.34、25.04、18.48μ g/mL.结论:该体系可以应用于3CL蛋白酶抑制剂的筛选,为新药研发提供了有力的工具.同时,5种活性提取物为筛选抗SARS-CoV-2活性成分提供了依据.
其他文献
目的:观察温经通络中药热膏摩联合痛泻药方治疗肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的临床疗效.方法:将96例肝郁脾虚证IBS-D患者随机分为两组,每组48例.治疗组予温经通络中药热膏摩联合痛泻要方治疗,对照组予匹维溴铵片治疗,两组疗程均为4周.观察两组患者治疗前后胃肠道症状评分、肠易激综合征严重程度评分(IBS-SSS)量表、生活质量评价量表(IBS-QOL)评分及中医证候评分,对比IBS-SSS及中医证候疗效,进而判定临床疗效.结果:治疗4周后,两组患者胃肠道症状评分、IBS-SSS评分及腹痛、腹泻
目的:探讨缺血性脑卒中气虚血瘀证与气滞血瘀证大鼠肠道菌群的差异.方法:44只SPF级7～9周龄SD大鼠随机分为4组.分别采用改良Z-longa线栓法制作大脑中动脉阻塞型缺血性脑卒中大鼠模型(MCAO组),力竭游泳结合线栓法制作缺血性脑卒中气虚血瘀证大鼠模型(QXY组),肾上腺素皮下注射联合多种混合刺激及线栓法制作缺血性脑卒中气滞血瘀证大鼠模型(QZY组),每组12只.另设假手术组(SOG组)8只.大鼠术后72h盲肠内容物进行16S rRNA基因测序检测肠道菌群,并进行生物信息学分析.结果:与SOG组比较,
目的:研究人参白术枣仁颗粒健脾养心、宁心安神和改善睡眠功能的药理作用及其作用机制.方法:采用负重游泳法复合药物诱导建立心脾两虚证失眠小鼠模型,观察人参白术枣仁颗粒对其体质量、小肠推进、悬尾不动时间、游泳时间、睡眠行为,以及脑中神经递质含量的影响.观察人参白术枣仁颗粒对正常小鼠自主活动和睡眠功能的影响.结果:与模型组比较,中药高剂量组能改善模型小鼠心脾两虚症状,延长游泳时间和睡眠时间、减少悬尾不动时间,增加5-HT含量、降低Glu含量(P＜0.05,P＜0.01),能减少正常小鼠自主活动次数、延长睡眠时间、
目的:探究调息操作对人体情绪反应的调节效应.方法:将招募入组的50名健康人,分为自然呼吸状态组(A组)和调息状态组(B组),通过听觉情绪刺激的oddball测验记录脑电事件相关电位变化,对两组P300峰值及脑电功率图进行对比分析.结果:P300峰值各脑区对比,正性音乐刺激条件下大脑顶区B组低于A组(P＜0.05),中性音乐刺激条件下大脑顶区、后颞区B组低于A组(P＜0.05),负性音乐刺激条件下大脑后颞区B组低于A组(P＜0.05),其余各脑区之间差异无统计学意义.相同刺激下两组脑电功率图对比,A组脑区高
目的:探究逍遥散对慢性轻度不可预见应激抑郁大鼠伏核脑区多巴胺(DA)及其受体DRD1、DRD2与多巴胺转运体(DAT)的调节作用.方法:对SPF级健康雄性SD大鼠进行糖水筛选实验,将筛选出的24只应激易感大鼠按随机数表法随机分为模型组、逍遥散组与IL-1RA组,每组8只.继续造模4周建立抑郁模型.造模期间逍遥散组每天给予2mL逍遥散混悬液灌胃,IL-1RA组大鼠隔天脑内微量注射IL-1RA溶液5μL.另设正常组和假手术组,每组8只.给药4周后采用新环境压抑进食实验、性行为测试观察各组大鼠行为学变化,HPL
目的:基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨土家族麝针疗法治疗大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠的作用机制.方法:将改良线栓法造模成功的模型大鼠随机分为模型对照组、土家族麝针组、针刺组,同时另设假手术组,每组20只.土家族麝针组以及针刺组分别以自制麝针、普通针灸针刺激对侧头皮运动区肌层进行治疗,假手术组和模型对照组不做任何处理.治疗后,取各组大鼠脑组织切片进行HE染色,采用ELISA法检测血浆中VEGF、HIF-1α的含量,Western Blot法检测脑组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白表达.结果:土
目的:探究钠钾ATP酶介导的腔上皮吸收与中医学收敛固涩作用的相关性.方法:通过功能类比研究钠钾ATP酶介导的腔上皮细胞吸收机制与中医学津液代谢的相关性,进一步通过实验研究收敛固涩类中药对正常与炎性状态下HCT-116细胞膜钠钾ATP酶活性的影响.结果:通过功能类比发现钠钾ATP酶介导的腔上皮细胞吸收机制与中医学的津液代谢具有很好的相关性,提出钠钾ATP酶很可能是收敛固涩类中药发挥固涩作用的重要靶蛋白的科学假说.进一步的实验研究发现收敛固涩类中药均能显著升高正常与炎性状态下HCT-116细胞膜钠钾ATP酶活
目的:观察天王补心丸的抗抑郁作用及其对雄性大鼠性功能的影响,旨在发掘天王补心丸的作用特点.方法:通过小鼠悬尾、强迫游泳和自发活动实验验证其抗抑郁药效与5-HT1A受体的关系;通过大鼠交配行为和非接触阴茎勃起实验验证药物对雄性大鼠性功能的影响,同时加入5-HT1A受体阻断剂WAY100635探讨其可能作用机制;ELISA法检测大鼠血清雄激素水平.结果:与空白组比较,天王补心丸低、中、高剂量组,氟西汀组,天王补心丸+WAY100635组小鼠悬尾不动时间显著降低(P＜0.05,P＜0.01),天王补心丸中、高剂
目的:运用现代声学技术采集和分析受试者的语音信号,找出其中与抑郁情绪相关的特征值,为抑郁情绪的评估提供客观参考.方法:28d内连续采集36名受试者晨起、睡前的固定模式语音信号,从中挑选噪音较小、吐字清晰的30名受试者15d的固定模式语音信号纳入分析数据库,基于matlab 2017a平台下的中医闻声诊数字化系统提取诊断相关特征值,并筛选与抑郁情绪相关的语音特征.结果:30名受试者晨起与睡前语音中的地鼓音幅值与均值比重、语音力度与均值比重、发音能量曲率拐点最大值与SDS分值显著相关(P＜0.01),以此建立
目的:观察参茸丸对卵巢卵泡生长发育的影响,对下丘脑-垂体-卵巢轴激素调节的作用以及对卵巢性激素受体的影响,以期探讨参茸丸对排卵障碍型不孕症的治疗作用.方法:采用丙酸睾酮所致排卵障碍型不孕大鼠模型,造模成功大鼠按体质量随机分为模型组,枸橼酸氯米芬组,参茸丸高、中、低剂量组,大鼠连续给药6周.采用HE染色及免疫组化染色检测大鼠卵巢、子宫病理形态及卵巢雌激素受体α(ERα)、促卵泡激素受体(FSHR)、促黄体生成素受体(LHR)蛋白表达情况;采用放射免疫分析法检测大鼠血清雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、卵