光皮树无性系ISSR-PCR反应体系的建立

来源 :经济林研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ailynn

【摘要】

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以光皮树基因组DNA为材料,采用单因素实验,测试了退火温度、模板用量、dNTP浓度、Taq酶用量、Primer浓度、Buffer用量和Mg2＋浓度等因素对ISSR-PCR的影响。优化的反应体系和条

【作者】

：

李昌珠李培旺张良波刘汝宽肖志红李力

【机构】

：

湖南省林业科学院,长沙创林科技有限公司

【出处】

：

经济林研究

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

光皮树退火温度种质资源基因定位 Swida wilsoniana （Wanger.）Sojak annealing temperature germp

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以光皮树基因组DNA为材料,采用单因素实验,测试了退火温度、模板用量、dNTP浓度、Taq酶用量、Primer浓度、Buffer用量和Mg2＋浓度等因素对ISSR-PCR的影响。优化的反应体系和条件：总体系为25μL,引物0.2μmol/L、模板20ng、Mg2＋2.5mmol/L、Taq酶0.5U、dNTP为0.1mmol/L和Buffer为2.5μL。扩增程序：94℃预变性5min,1个循环;94℃变性50s,52℃退火1min,72℃延伸1.5min,40个循环;72℃后延伸10min,1个循环。该

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