【摘 要】
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根据GenBank中登录的禽波氏杆菌(B.avium)16S rRNA和ompA基因序列设计引物,经PCR反应条件优化,建立了检测禽波氏杆菌的双重PCR方法.该方法能够同时扩增B.avium基因组中的16S
【机 构】
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山东农业大学动物科技学院,山东泰安,271018;泰安市畜牧兽医局,山东泰安,271001
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根据GenBank中登录的禽波氏杆菌(B.avium)16S rRNA和ompA基因序列设计引物,经PCR反应条件优化,建立了检测禽波氏杆菌的双重PCR方法.该方法能够同时扩增B.avium基因组中的16S rRNA和ompA基因的特异序列,而对禽源大肠埃希菌(Escherichia coli)、沙门菌(Salmonella)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)等菌株的扩增结果均为阴性.该方法对B.avium基因组DNA检测的敏感性可达1.25×104 copies/μL,对其菌液检测的敏感性可达1.2×103 cfu/mL,对临床样品的检测结果表明,建立的双重PCR方法与16S rRNA单一PCR检测方法符合率为100％.建立的双重PCR检测方法为B.avium的检测提供了快速、准确、灵敏、特异的检测方法.
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