【摘 要】
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目的:探讨N末端的缺失对牙龈卟啉单胞菌FtsZ体外聚合的影响。方法:将质粒pEZ1(PgFtsZ,携带野生型牙龈卟啉单胞菌FtsZ的基因)、pYWN1(ZΔN01,携带PgFtsZ的N末端去除了43个保守
【机 构】
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哈尔滨工业大学口腔医学中心口腔医学及材料研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:30371538)
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目的:探讨N末端的缺失对牙龈卟啉单胞菌FtsZ体外聚合的影响。方法:将质粒pEZ1(PgFtsZ,携带野生型牙龈卟啉单胞菌FtsZ的基因)、pYWN1(ZΔN01,携带PgFtsZ的N末端去除了43个保守性氨基酸残基的缺失变异型PgFtsZ的基因)和pYWN2(ZΔN02,携带PgFtsZ的N末端去除了205个保守性氨基酸残基的缺失变异型Pg-FtsZ的基因)分别导入Escherichia coli BL21(DE3)pLysS中表达,通过IPTG诱导表达目的蛋白质,6 mol/L尿素变性及HiTrap SP层析柱纯化目的蛋白质,最后通过沉淀法检测10 mmol/L的MgCl2、CaCl2和MnCl2对PgFtsZ、ZΔN01和ZΔN02体外聚合的影响。结果:10 mmol/L的MgCl2、CaCl2和MnCl2均能诱导PgFtsZ和ZΔN01出现聚合反应,然而10 mmol/L的MgCl2和CaCl2没能引起ZΔN02的体外聚合,而仅有10 mmol/L的MnCl2能诱导ZΔN02出现聚合反应,但效果不如PgFtsZ和ZΔN01明显。结论:PgFtsZ的N末端的43个氨基酸残基对Mg2+、Ca2+和Mn2+诱导其体外聚合反应影响不大,而后的162个氨基酸残基在PgFtsZ的体外聚合过程中起着关键的作用。
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