HBV基因组各基因真核表达载体的构建及转染

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【摘要】

：

目的构建HBV基因组各基因真核表达载体，转染HepG2细胞，建立稳定转染的HepG2细胞系。方法采用PER方法，以HBV全基因组质粒为模板扩增HBV基因的各基因片段，利用DNA重组技术将其定向

【作者】

：

汤玉瑜陈永文郭晟吴玉章

【机构】

：

第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所

【出处】

：

免疫学杂志

【发表日期】

：

2008年3期

【关键词】

：

HBV 真核表达载体稳定转染的HepG2细胞系基因表达 HBV Eukaryotic expression vector Stable transfecte

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目的构建HBV基因组各基因真核表达载体，转染HepG2细胞，建立稳定转染的HepG2细胞系。方法采用PER方法，以HBV全基因组质粒为模板扩增HBV基因的各基因片段，利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3．1（＋），经酶切和测序鉴定后，用脂质体转染法转染HepG2细胞，通过C418筛选，建立稳定转染的HepG2细胞系，用细胞流式技术及细胞免疫组化技术检测HBV各基因产物在细胞内的表达。结果成功构建了pcDNA3．1（＋）／HBs、pcDNA3．1（＋），HBc、pcDNA3．1（＋）／H

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