【摘 要】
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目的:利用荧光标记法观察代谢抑制处理后,大鼠心肌细胞反向Na+/Ca2+交换体(NCX)转运功能的变化.方法:酶解法分离制备钙耐受心肌细胞用Fura-2/AM负载,采用双激发荧光光电倍增
【机 构】
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陕西师范大学生命科学学院,第四军医大学,第四军大医学
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目的:利用荧光标记法观察代谢抑制处理后,大鼠心肌细胞反向Na+/Ca2+交换体(NCX)转运功能的变化.方法:酶解法分离制备钙耐受心肌细胞用Fura-2/AM负载,采用双激发荧光光电倍增系统(IonOptix Photometry System)检测钙信号.结果:细胞置于无Na+液后,可见[Ca2+]i逐渐升高,L-型Ca2+通道阻断剂nifedipine在浓度为1μmol/L时,不影响此现象;而NCX的抑制剂Ni2+,在浓度为1 mmol/L时,则完全阻断[Ca2+]i的升高.采用20mmol/L乳酸加10 mmol/L脱氧葡萄糖作为代谢抑制物处理心肌细胞不同时间,正常Tyrode液灌流10 min,之后检测无Na+液引发[Ca2+]i升高效应的变化,发现5 min处理与对照组无显著性差异,10和30 min处理后此效应逐渐减弱.结论:首次发现,代谢抑制处理后心肌NCX的反向转运功能被抑制,阐明其调节机制,将为心肌缺血/再灌注损伤的治疗提供新思路.
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