中成药DNA检测标准物质的制备及评价

来源 :中国药学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:li132zhihua
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 研究制备和评价DNA检测标准物质的方法,为促进聚合酶链式反应(PCR)检测方法在中成药检验中的应用提供保证.方法 以水稻源性DNA检测标准物质(水稻标准物质)为例,依据CNAS-GL03:2018《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》和CNAS-GL017:2018《标准物质/标准样品定值的一般原则和统计方法》的要求,随机抽取足够的样本,采用电泳检测方法对水稻DNA标准物质的上样量、均匀性、稳定性和光密度值等指标进行考察.结果 水稻DNA标准物质的提取效率良好,选用0.5 ng冻干样品上样量可满足试验要求,均匀性和稳定性符合规定.结论 本研究对此类标准物质的制备过程进行了系统的研究,成功制备了首个中成药DNA检测标准物质,为中药基因检测方法研究提供了技术参考.
其他文献
蛋白降解嵌合体(proteolysis targeting chimeras,PROTACs)是一类具有募集靶蛋白并诱导其泛素化降解的双功能分子.相较于传统小分子抑制剂,PROTACs这种直接降解目标蛋白的作用模式具有高选择性,高效性,更重要的是该技术可以靶向不可成药蛋白,解决小分子药物耐药性问题等优势.E3泛素连接酶参与泛素蛋白酶体系统降解途径,决定PROTACs分子靶向E3泛素连接酶部分的特异性识别,庞大的E3家族对PROTACs技术的发展至关重要.第二代小分子类PROTACs相较于第一代多肽类PRO
目的 基于聚合酶链式反应(PCR)技术,利用核酸扩增产物,建立一种可以快速鉴定金钱白花蛇中药材真伪的可视化试纸条检测方法.方法 提取金钱白花蛇、赤链蛇及市售样本的基因;根据mtDNA Cytb序列进行对比分析,设计1对特异性鉴别引物,进行修饰物标记;建立鉴别PCR反应体系,使用核酸扩增产物,利用可视化试纸条对市售样本进行真伪鉴定.结果 鉴别引物可将正品金钱白花蛇中药材扩增出500~600 bp之间的特异性条带,而伪混品则不出现相应的特异性条带;可视化试纸条对市售样本进行检测,鉴别效果良好,灵敏度高,可准确
目的 基于入血成分和网络药理学研究策略,探讨连夏消痞颗粒治疗功能性消化不良的潜在药效物质基础.方法 采用超高效液相联用四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)结合Simca-P软件对连夏消痞颗粒大鼠给药后血浆及尿液中原型成分进行定性解析.采用TCMSP、OMIM等在线数据库搜集化合物及疾病靶点,取交集后构建蛋白互作网络,筛选核心靶点并进行通路富集.采用Cytoscape软件构建活性成分-靶点-通路网络图;采用分子对接,对排名靠前的化学成分与靶点的相互关系进行验证,为体内药效物质基础研究提供参考.结
目的 建立头孢噻吩杂质A的首批国家标准物质,为2020年版《中国药典》头孢噻吩的检测提供必需的标准物质.方法 首先,采用红外、质谱和核磁共振的方法时头孢噻吩杂质A进行结构确证.其次,采用2020年版《中国药典》头孢噻吩有关物质检查项下的方法,测定头孢噻吩杂质A的纯度.然后,测定头孢噻吩杂质A的干燥失重和炽灼残渣.最后,采用质量平衡法对首批头孢噻吩杂质A国家标准物质进行赋值,同时采用核磁定量法测定其含量,与质量平衡法测得的结果相互验证.结果 头孢噻吩杂质A与2020年版《中国药典》规定的结构相同,质量平衡法
目的 探讨利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术鉴别西洋参的方法.方法 针对西洋参的CYP450基因设计特异性引物,应用RT-LAMP(real time-LAMP)、琼脂糖凝胶电泳和可视化检测3种方法对LAMP检测方法进行优化,并对其灵敏性和特异性进行了评价.结果 LAMP反应体的最佳孵育时间为60 min,最佳反应温度为65℃,最适内外引物比为8∶1.反应体系的灵敏度达到0.5 ng·μL-1,特异性较好,能与近缘植物人参相
目的 回顾与反思药学类专业认证15年发展历程,在此基础上总结经验、查找问题、展望未来,进一步完善我国药学类专业认证体系,保证和提高我国高等药学教育质量.方法 采用历史法、比较法、文献分析法,对过去15年我国药学类专业认证发展历程进行全面梳理和总结,开展中国与美国药学教育认证体系比较.结果 深刻剖析中美药学教育认证在认证组织管理和认证标准领域的异同点,系统阐释我国药学类专业认证特征、问题与对策.结论 “十四五”时期,我国要建立以“专业认证”为核心、体现“中国特色、世界水平”的药学教育质量保证体系.
目的 探究山西不同产地酸枣简单重复序列区间(ISSR)分子标记遗传多样性与5种主要化学成分之间的关系.方法 利用ISSR分子标记技术对山西省26个不同产地酸枣进行遗传多样性分析,并对药材酸枣仁中5种化学成分进行含量测定,在此基础上使用TASSEL软件对ISSR分子标记实验结果和化学成分含量进行关联性分析.结果 山西不同产地酸枣具有丰富的遗传多样性,遗传一致度在0.7272~0.9498之间,聚类分析表明地理位置并非影响酸枣居群间基因交流的主要因素.不同产地酸枣5种化学成分含量范围:木兰花碱含量0.745~
目的 探讨口服调释类仿制药研发中乙醇诱导的剂量倾泻研究要求.方法 结合审评实际情况,对口服调释类仿制药乙醇诱导的剂量倾泻研究中常见问题进行了分析,总结了国内外药品监管机构相关的技术要求,提出了研究建议.结果 与结论乙醇可能会改变调释制剂药物释放特性,带来用药安全性和有效性问题.建议口服调释类仿制药研发时予以关注,并进行相应的体外研究,以评价制剂在体内乙醇环境中出现药物突释(剂量倾泻)的可能性.
目的 考察药用丁基胶塞与13价肺炎球菌多糖结合疫苗的相容性.方法 采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-电雾式检测器(HPLC-DAD-CAD)同时测定胶塞和疫苗中抗氧剂、硫化剂、软脂酸和硬脂酸的含量,以抗氧剂BHT、抗氧剂1010、抗氧剂1076、对叔戊基苯酚、2-氯4-叔戊基苯酚、硫磺以及软脂酸和硬脂酸含量为指标,通过提取试验和迁移试验研究胶塞和疫苗的相互作用,并评价其相容性.结果 测定胶塞和疫苗中抗氧剂、硫化剂、软脂酸和硬脂酸含量的方法易操作、快速、灵敏,各试验指标均符合方法验证技术要求.3批胶塞提取
目的 建立蒙药扎冲十三味丸中4种成分(丁香酚、木香烃内酯、去氢木香内酯、去氢二异丁香酚)的一测多评方法(QAMS),验证该方法在蒙药扎冲十三味丸质量分析中的可行性与科学性.方法 采用高效液相色谱法(HPLC),以丁香酚为内参物,建立木香烃内酯、去氢木香内酯、去氢二异丁香酚的相对校正因子,利用相对校正因子计算蒙药扎冲十三味丸中该3种成分的含量,同时采用外标法(ESM)计算各成分的含量,并比较2种方法之间的差异.结果 木香烃内酯、去氢木香内酯、去氢二异丁香酚的相对校正因子(fs/ii)分别为0.5607、0.