婴幼儿轮状病毒VP7基因表达产物生物学活性研究

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目的 诱导并分析克隆婴幼儿轮状病毒VP7基因表达及其生物学活性,为进一步构建轮状病毒基因工程疫苗奠定基础。方法 扩增与纯化VP7基因,并与pEDM27/5载体进行连接,转化乳酸杆菌,乳糖进行诱导表达,用鼠抗Vp7蛋白单克隆抗体特异性结合表达的Vp7蛋白,并测定其生物学活性。结果 成功扩增婴幼儿轮状病毒VP7基因,并转化pEDM27/5载体,通过蓝白斑筛选DNA阳性重组子,转化感受态乳酸杆菌,SDS—PAGE电泳可见乳糖诱导后一条分子量约为28kD的蛋白带高效表达,并能与抗婴幼儿轮状病毒VP7蛋白特异结合。
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