稳定表达细胞周期蛋白D1反义基因逆转人胃癌细胞恶性表型

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:libra_15
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目的探讨细胞周期蛋白D1对肿瘤生物学行为的影响及用于基因治疗的可能.方法利用重组技术将人细胞周期蛋白D1 cDNA全片段克隆至亚克隆载体Bluescript-KS中.利用该载体内的T2/T3成对启动子体系,体外转录法制备正、反义细胞周期蛋白D1单链RNA探针.同时利用该载体转换酶切位点的作用,构建了人细胞周期蛋白D1反义RNA真核表达载体pDORD1AS,阳离子脂质体介导下转染胃癌细胞株,经G418筛选获得细胞周期蛋白D1反义RNA稳定表达的阳性细胞克隆.用免疫细胞化学、流式细胞仪、分子杂交、病理形态学和
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