大约克猪 SLA-1原核表达载体的构建及表达

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:binics
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为构建大约克猪 SLA-1胞外区的原核表达载体及表达目的蛋白,试验设计1对引物,经 PCR 扩增获得大约克猪 SLA-1胞外区基因(命名为 SLA-1-DYKe),将此片段克隆至 pMD 19-T Simple Vector,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,经 Nde Ⅰ和 Xho Ⅰ双酶切筛选阳性克隆菌并测序,将目的基因插入到原核表达载体 pET-28a (+)中,转化至宿主菌 BL21(DE3)进行诱导表达,用 SDS-PAGE 检测目的蛋白的表达情况,大量诱导提取包涵体并检测。结果显示,PCR 成
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