人角膜缘干细胞提取方法的比较性研究

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目的:比较组织块培养法、酶消化法及平板离心法获取角膜缘干细胞的不同。方法:取得人组织,分别应用组织块培养法、酶消化法及平板离心法获得角膜缘细胞并进行原代细胞培养,对获得的细胞通过免疫组化方法研究其p63、ABCG2及K3表达情况,以比较上述3种方法的不同之处。结果:3种方法均可获取大量阳性表达p63、ABCG2及阴性表达K3的细胞,符合角膜缘干细胞特点,但其中组织块培养法中阴性表达p63的细胞略多,并偶见阳性表达K3的细胞;另外,在提取细胞的实验操作方面,组织块培养法耗时约7天,酶消化法耗时约1天,平板离心法耗时约2天;在获得细胞量方面,1枚人角膜缘材料酶消化法可获得的细胞数量在此3种方法中通常最少。结论:平板离心法在目前常用的人角膜缘干细胞提取方法中可能是最具优越性的。
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