猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立

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根据已发表的PCV-1和PCV-2全基因组序列,设计了3条引物,组成PCV-2的特有引物对和PCV-1、PCV-2的共有引物对,分别扩增长度为472bp和339bp的片段.为验证PCR扩增的特异性,将472bp的扩增产物纯化后,克隆到pMD 18-T载体,转化大肠埃希氏菌TG1,对阳性克隆进行酶切及PCR鉴定,并测序.将该序列递交NCBI进行BLAST同源序列比较,发现它与美国、加拿大及我国台湾的PCV-2毒株核苷酸序列的同源性均在99%以上,与PCV-1毒株的同源性为86%.结果显示,该方法最少可用于3
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