新疆细毛羊抑制素α亚基cDNA的克隆、序列分析与表达

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuyixinsiboy
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根据GenBank上登录的绵羊抑制素α亚基基因序列,设计合成2对引物,以新疆细毛羊卵巢提取的总RNA为模板,采用RT—PCR方法扩增获得了约812bp片段,经pMD18-T载体克隆和测序分析证实为新疆细毛羊抑制素α亚基前体基因。进一步通过PCR反应扩增新疆细毛羊INHα亚基基因片段,经过NcoⅠ和HindⅢ双酶切后定向克隆于pET32a原核表达载体,获得pET—INH重组表达载体。将携带有重组表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过1 mmol·L^-1IPTG进行诱导表达,经过SDS-PAGE
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