褐飞虱诱导的水稻cDNA文库的构建及锌指蛋白基因的分离

来源 :武汉植物学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yjf987

【摘要】

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从褐飞虱取食48h后的水稻幼苗中提取总RNA并纯化出mRNA，经反转录合成第一、二链cDNA，去除小于400bp的cDNA片断后，连接EcoR I人工接头，与去磷酸化的噬菌体长短臂连接，体外包装后感

【作者】

：

王小兰祝彩磊祝莉莉何光存

【机构】

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武汉大学植物发育生物学教育部重点实验室

【出处】

：

武汉植物学研究

【发表日期】

：

2004年1期

【关键词】

：

褐飞虱 CDNA文库锌指蛋白 Nilaparvata lugens cDNA library Dof zinc finger protein

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从褐飞虱取食48h后的水稻幼苗中提取总RNA并纯化出mRNA，经反转录合成第一、二链cDNA，去除小于400bp的cDNA片断后，连接EcoR I人工接头，与去磷酸化的噬菌体长短臂连接，体外包装后感染，成功构建了含1．1×10^4重组子的褐飞虱诱导的水稻cDNA表达文库，重组子平均外源片断为1．5kb，扩增后的cDNA文库滴度为1．1×10^11pfu／mL，适用于筛选低丰度mRNA的cDNA克隆。将已筛选得到的EST BPHiw001为探针，在褐飞虱诱导的水稻cDNA文库中筛选得到1

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