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构建人Cfos启动子调控的单纯疱疹病毒(HSV)-胸苷激酶(TK)自杀基因重组腺病毒载体，观察其介导的HSV-TK/更昔洛韦(GCV)系统对胶质瘤细胞的杀伤作用。
方法构建重组腺病毒载体Ad-Cfos-TK-IRES-hr绿色荧光蛋白(GFP)、Ad-CMV-TK-IRES-hrGFP，转染至HEK293细胞获得重组腺病毒Ad-Cfos-TK-IRES-hrGFP、Ad-CMV-TK-IRES-hrGFP，荧光计数法检测病毒滴度；将病毒感染U251、U87细胞，荧光显微镜下观察GFP的表达。将病毒感染U251、U87细胞，24 h后加入1000、100、10、1、0.1、0.01、0 μmol/L GCV作用48 h, CCK-8法检测各组细胞抑制率。
结果成功构建重组腺病毒载体pDC315-CMV-TK-IRES-hrGFP、pDC315-CFOS-TK-IRES-hrGFP。荧光计数法检测显示2种腺病毒滴度均达1×1010 PFU/mL。在病毒感染复数(MOI)为100、GCV浓度为1、10、100、1000 μmol/L时，转染Ad-Cfos-TK-IRES-hrGFP组U251细胞抑制率分别为(24.18±6.01)%、(30.39±9.67)%、(57.07±9.29)%、(94.50±3.48)%，转染Ad-Cfos-TK-IRES-hrGFP组U87细胞细胞抑制率分别为(9.78±2.24)%、(86.33±5.06)%、(98.48±0.79)%、(98.76±0.93)%。
结论腺病毒介导的HSV-TK/GCV系统在Cfos启动子调控下在体外可以有效杀伤胶质瘤细胞。