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氩离子注入介导麻黄基因组DNA转化获得产麻黄碱重组酵母菌

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：reemchan

【摘 要】

：

通过氩离子（Ar＋）注入介导蓝麻黄基因组DNA在异常汉逊酵母（Hansenula anomala）中随机转化,转化后的酵母菌经BTB指示性辅助筛选、斜面传代、液体培养、铜铬盐定性检识和RP-HPLC定量

【作 者】

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毛培宏 马向东 金湘 杨红梅 娄恺 凌海秋 柯涛 武宝山 

【机 构】

：

新疆大学离子束生物技术中心,新疆特殊环境微生物实验室新疆农业科学院微生物研究所,湖北大学生命科学学院

【出 处】

：

微生物学报

【发表日期】

：

2007年5期

【关键词】

：

氩离子注入 介导 麻黄基因组DNA 重组酵母 麻黄碱 Ar^＋ implantation mediated Ephedra genome DNA recombi 

【基金项目】

：

国家自然科学基金（10365001）致谢 感谢中国科学院离子柬生物工程重点实验室余增亮研究员、吴李君研究员对本项工作的大力帮助,感谢乔坤云高级实验师、周俊副研究员和冯婷硕士进行RP-HPLC的分析测试工作,感谢新疆国际实业股份有限公司麻黄素事业部提供RP-HPLC测试用麻黄碱和伪麻黄碱标准品.

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通过氩离子（Ar＋）注入介导蓝麻黄基因组DNA在异常汉逊酵母（Hansenula anomala）中随机转化,转化后的酵母菌经BTB指示性辅助筛选、斜面传代、液体培养、铜铬盐定性检识和RP-HPLC定量检测,获得了遗传稳定的以葡萄糖为碳源、NaNO3为氮源生物合成麻黄碱和（或）伪麻黄碱的重组酵母菌3株。液体培养72h,RP-HPLC测试胞外麻黄碱和伪麻黄碱的最高产量分别为11.87mg/L和4.11mg/L;胞内伪麻黄碱最高含量为294.86mg/g干细胞,胞内麻黄碱未检出。分析了Ar＋注入介导蓝麻黄基因

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