【摘 要】
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目的：基于网络药理学预测四逆汤抗心肌缺血/再灌注损伤（MI/RI）的作用机制及验证研究。方法：通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）数据库筛选检索四逆汤的主要成分，并通过TCMSP平台筛选潜在的成分靶点，结合人类孟德尔遗传数据库（OMIM）和GeneCards数据库获取经人工确认的四逆汤抗MI/RI的作用靶点。应用蛋白互作网络分析数据库（String）构建蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81303243）； 陕西省教育厅项目（20JC012）； 陕西中医药大学创新团队项目（2019-QN02）；
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目的：基于网络药理学预测四逆汤抗心肌缺血/再灌注损伤（MI/RI）的作用机制及验证研究。方法：通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）数据库筛选检索四逆汤的主要成分，并通过TCMSP平台筛选潜在的成分靶点，结合人类孟德尔遗传数据库（OMIM）和GeneCards数据库获取经人工确认的四逆汤抗MI/RI的作用靶点。应用蛋白互作网络分析数据库（String）构建蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络模型，应用DAVID数据库分别进行基因本体（GO）功能富集分析和京都基因和基因百科全书（KEGG）通路富集分析，利用细胞实验进行验证，以揭示四逆汤抗MI/RI的机制。结果：从四逆汤中共筛选得到105个活性成分，234个靶点，治疗MI/RI靶点116个。GO功能富集分析得到GO条目587个，其中生物过程条目417个、细胞组成条目101个和分子功能条目69个；KEGG通路富集分析筛选出125条信号通路，主要涉及细胞内皮生长因子（VEGF）、磷酸肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）、叉头框转录因子O（FoxO）、缺氧诱导因子1（HIF-1）、细胞凋亡等信号通路。细胞存活率检测结果表明四逆汤可增加缺氧/复氧（H/R）损伤的H9C2细胞存活率；试剂盒检测结果表明四逆汤可降低H/R损伤的H9C2细胞中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、肌酸磷化酶-同功酶（CK-MB）的水平；流式细胞仪检测结果表明四逆汤可降低H/R损伤的H9C2细胞凋亡率；蛋白免疫印迹法（Western blot）结果显示四逆汤可降低H/R损伤的H9C2细胞中Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达，增加B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的表达。结论：四逆汤抗MI/RI呈现多靶点、多通路协同作用，治疗机制可能与细胞凋亡相关信号通路有关。
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