【摘 要】
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利用酶联免疫吸附法(ELISA法)对制备的2种丝素蛋白抗体(抗体Ⅰ和抗体Ⅱ)的效价进行检测,在二抗羊抗兔IgG-HRP使用5 000倍稀释浓度及丝素蛋白最佳包被质量浓度下,抗体Ⅰ与抗体
【机 构】
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浙江大学动物科学学院,杭州310058;中国丝绸博物馆,杭州310012
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利用酶联免疫吸附法(ELISA法)对制备的2种丝素蛋白抗体(抗体Ⅰ和抗体Ⅱ)的效价进行检测,在二抗羊抗兔IgG-HRP使用5 000倍稀释浓度及丝素蛋白最佳包被质量浓度下,抗体Ⅰ与抗体Ⅱ的效价分别为1∶60000和1∶20000,且抗体Ⅰ对丝素蛋白的特异性更好.利用抗体Ⅰ对浙江省安吉县出土的战国时期(约公元前200年)的2份丝织品进行ELISA定性检测,结果2份样品均呈阳性,说明其为丝素蛋白纤维织物.进一步建立定量检测丝素蛋白的间接竞争ELISA方法,其标准曲线回归方程为Y=3.620 2X2-7.515 2X+3.645 5,检测限为0.48 μg/mL.定量检测上述2份出土丝织品样品提取液中的丝素蛋白含量,其质量浓度分别为50.67 μg/mL和128.65 μg/mL.采用这种基于丝素蛋白特异抗体的ELISA检测方法,对样品中丝素蛋白的检测灵敏度高,特异性好,并且检测成本低,可用于对考古现场发掘丝织品的快速鉴定.研究结果也提示丝素蛋白在家蚕漫长的进化过程中仍然具有高度的保守性.
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