骨髓间充质干细胞对高氧暴露新生大鼠肺损伤的干预作用

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目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)对高氧引致新生大鼠肺组织损伤的干预作用.方法 采用贴壁选择法分离、培养、扩增大鼠骨髓MSC,并以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)进行标记,注射前以磷酸盐缓冲液(PBS)稀释;32只3日龄SD大鼠随机分为4组:A、C组高氧(95%)暴露7 d后,腹腔分别注射含和不含5×104MSC的PBS各50μl;B、D组空气暴露7 d后,腹腔分别注射含和不含5×104MSC的PBS各50μl.于注射后72 h(13日龄)腹腔注射10%水合氯醛后放血处死,肺组织病理学检测辐射状肺泡计数(RAC);支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数检测白细胞及其中性粒细胞;ELASA法检测肺组织匀浆肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β含量.免疫组化双染法检测BrdU和肺泡表面活性物质结合蛋白a(sP-A)表达情况.结果 (1)RAC(个):4组比较差异有统计学意义(11.0±1.0、13.9±1.1、9.6±0.7、14.0±1.1,P=0.000);A、C组均明显低于D组(均P<0.05),A组高于C组(P<0.05).(2)BALF细胞计数:4组白细胞(105/ml:0.85 ±0.21、0.18±0.10、1.44±0.69、0.21±0.06)和中性粒细胞(105/ml:0.32±0.12、0.06±0.02、0.73±0.35、0.07±0.02)计数比较,差异均有统计学意义(均P=0.000);A、C组均明显高于D组(均P<0.05);A组均低于C组(均P<0.05).(3)肺组织匀浆TNF-α及IL-1β含量:4组肺组织匀浆TNF-α(pg/ml:173±20、34±4、224 ±42、35±4)及IL-1β含量(pg/ml:530±74、210±33、948±82、216±30)比较,差异均有统计学意义(均P=0.000);A、C组均明显高于D组(均P<0.05),A组低于C组(均P<0.05).(4)免疫组化:A、B组均有BrdU及SP-A阳性细胞,A组还可见免疫双染阳性细胞;C、D组仅见SP-A阳性细胞.结论 腹腔注射Msc对高氧暴露新生大鼠的肺损伤起保护作用,其保护作用涉及多种机制。

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